Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 78

Cobertura dos bioquímicos
1. Utilizando um frasco doseador, cobrir os poços ARG e URE com, pelo menos, 3 gotas de óleo mineral. (Estes poços
estão sublinhados no painel.)
2. Os meios nos poços têm que estar completamente cobertos com óleo mineral, mas este não deve transbordar dos
poços.
NOTA: os instrumentos WalkAway SI e WalkAway plus (e os instrumentos WalkAway atualizados com a funcionalidade
de adição automática de óleo) adicionam automaticamente óleo aos poços adequados.
Incubação
1. Os painéis podem ser incubados num sistema WalkAway ou incubados «offline» completando os passos seguintes:
A. Para assegurar uma distribuição térmica uniforme durante a incubação, empilhe os painéis em grupos de 3–5.
B. Colocar um tabuleiro de cobertura limpo por cima de cada grupo de painéis para evitar a evaporação. Os tabuleiros
de cobertura podem ser reutilizados. Não descontamine os tabuleiros de cobertura com álcool. Estes podem ser
lavados com água e sabão. Enxaguar bem e deixar secar ao ar.
C. Incubar os painéis durante 16–20 horas a 35 °C numa incubadora sem CO
Leitura dos painéis
Os painéis podem ser lidos manualmente utilizando o Visualizador de microdiluição MicroScan e os resultados registados ou
os instrumentos MicroScan (sistemas autoSCAN-4 e WalkAway). Consultar o LabPro Operator's Guide (Manual do Operador
do LabPro) para obter instruções sobre a leitura dos painéis com os instrumentos MicroScan.
1. Após 16–20 horas de incubação, retirar os painéis da incubadora.
2. Limpar o fundo do painel com um pano sem pelos para remover qualquer condensação ou quaisquer detritos que
possam estar presentes.
3. Efetuar a leitura dos painéis apenas se o poço de controlo estiver límpido e se o poço de controlo de crescimento
apresentar turvação. Não proceder à leitura dos antimicrobianos se o poço de controlo estiver turvo ou se não houver
crescimento no poço de crescimento. O crescimento nos poços manifesta-se como turvação, que pode assumir a forma
de uma sombra branca em todo o poço, uma mancha circular branca no centro do poço ou um crescimento granular
fino em todo o poço. O crescimento inadequado manifesta-se como uma ligeira cor esbranquiçada no poço ou meio
líquido límpido.
4. Se os resultados forem lidos manualmente, registar os resultados no formulário apropriado.
5. Leitura das sensibilidades a agentes antimicrobianos (CIM)
A. Ler todos os antimicrobianos, CV, MS, NOV, OPT, NACL e BAC contra um fundo preto (com luz indireta).
B. Realizar o teste de β-lactamase para estafilococos com uma CIM de penicilina ≤0,12 μg/mL.
C. Registar os resultados da CIM do seguinte modo:
a. Após 16–20 horas de incubação, a CIM é registada como a concentração antimicrobiana mais baixa que
evidencia inibição de crescimento.
b. Quando ocorre crescimento em todas as concentrações de um agente antimicrobiano, a CIM é registada
como superior (>) à concentração mais elevada.
c. Quando não ocorre crescimento em qualquer uma das concentrações de um antimicrobiano, a CIM é
registada como inferior ou igual (≤) à concentração mais baixa.
d. Um poço límpido numa série de poços de crescimento, por ex., crescimento para 1, 2 e 8 μg/mL, mas não
para 4 μg/mL, é denominado um poço «ignorado» e deve, assim, ser ignorado.
e. O crescimento pontual em poços isolados indica contaminação. O teste deve ser repetido.
f. No caso de estafilococos com oxacilina, qualquer tipo de crescimento deve ser considerado significativo.
D. A deteção precisa da resistência requer tempos de incubação mais prolongados para:
Incubação
24 horas
24–48 horas
1. Não é necessária uma incubação de 24 horas para espécies de estafilococos em painéis que contenham o Poço de rastreio de cefoxitina.
C29870–AD
Organismo
Enterococos
Estafilococos
Estreptococos
Enterococos
Antimicrobianos
Rastreio de sinergia com
canamicina
Oxacilina 1
Rastreio de sinergia com
canamicina
Sinergia com estreptomicina
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