Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 295

WalkAway-traydeksels (B1018-18)
PROCEDURE
Panelvoorbereiding
1. Haal de benodigde panels uit de opslag. Gebruik de panels niet als de integriteit van de verpakking is aangetast
(geperforeerd, gescheurd of niet afgedicht).
2. Snijd de zak open en haal de panel eruit. Haal de panel onmiddellijk uit de folieverpakking als deze in de koelkast is
bewaard.
3. Panels mogen niet worden gebruikt in een van de volgende situaties:
A. Er is geen dehydratiemiddel of de verpakking van het middel is gescheurd.
B. De panelwells zijn verkleurd (bijv. PHO, verschillende antimicrobiële stoffen).
4. Laat de panels voorafgaand aan rehydratie acclimatiseren tot kamertemperatuur. Panels mogen worden gestapeld als
er een schone afdektray bovenop wordt gelegd. Alle geopende panels moeten op dezelfde dag worden gebruikt en
anders worden weggeworpen.
Voorbereiding van het inoculum
CLSI raadt u aan om de dichtheidswaarden van het inoculum regelmatig te controleren door het aantal kolonies te tellen.
Raadpleeg het CLSI-document M07-A10 voor aanbevelingen met betrekking tot het tellen van kolonies. De verwachte
resultaten voor E. coli ATCC 25922 moeten in de buurt komen van 5 x 10
gebruiker moet uiterst zorgvuldig te werk gaan bij het prepareren van het inoculum. Dit geldt met name voor handmatige
methoden die techniekafhankelijk zijn, zoals het Prompt-systeem, of bij het voorbereiden van een inoculum zonder
fotometrieapparaat.
Opmerking: logaritmische- en stationairefasetechnieken worden niet ondersteund door MicroScan-producten.
1. Standaard troebelheidstechniek - primaire inoculatiemethode
De standaard troebelheidstechniek wordt aanbevolen voor directe inoculatie van alle aerobe grampositieve kokken of
voor detectie van meticillineresistente stafylokokken.
A. Raak met behulp van een steriel applicatorstokje, applicatorlus of wattenstaafje het oppervlak aan van 4-5 grote
of 5-10 kleine morfologisch gelijkaardige, goed geïsoleerde kolonies op een niet-remmende agarplaat na 18-24
uur incubatie.
B. Emulgeer de suspensie in 3 mL inoculatiewater (geautoclaveerd gedeïoniseerd water).
C. Draai de dop stevig vast en plaats de suspensie gedurende 2-3 seconden in de vortexmixer. De uiteindelijke
troebelheid moet gelijk zijn aan een troebelheidsstandaard van 0,5 McFarland. U kunt een gelijkwaardige
troebelheid bereiken door gebruik te maken van een MicroScan-troebelheidsmeter met een bereik van 0,08 ±
0,02.
D. Pipetteer 0,1 mL (100 µL) van de gestandaardiseerde suspensie in 25 mL inoculatiewater met PLURONIC. Draai
de dop stevig vast. Meng de suspensie door deze 8-10 keer om te keren.
2. Prompt-systeem
Het Prompt-systeem kan worden gebruikt voor de sneller groeiende grampositieve kokken. Raadpleeg de Prompt
Inoculation Procedural Manual (Prompt-inoculatieprocedurehandleiding) voor meer informatie over het juiste gebruik
van het Prompt-systeem.
Opmerking: voorzichtig gebruiken. Onder-inoculatie kan plaatsvinden bij organismen die niet de juiste grootte hebben
en kan leiden tot verkeerde testresultaten voor gevoeligheid en identificatie. Tevens kunnen met de Prompt-methode
de tellingen voor kolonies van stafylokokken verhoogd zijn en boven het verwachte CLSI-bereik liggen. Verhoogde
kolonietellingen kunnen antibioticaresultaten die van het inoculum afhankelijk zijn negatief beïnvloeden. Raadpleeg het
gedeelte Beperkingen voor antimicrobiële stoffen waarvan bekend is dat deze afhankelijk zijn van het inoculum.
Panelrehydratie/-inoculatie
Rehydratie en inoculatie worden uitgevoerd met behulp van het RENOK-systeem met Inoculators-D (B1013-4). Raadpleeg
de RENOK Operator's Manual for use (RENOK-bedieningshandleiding voor gebruik).
inoculatiewater (PLURONIC) als u een ander systeem gebruikt.
10 5 CFU/mL worden bereikt. Prepareer een zuiverheidsplaat om de levensvatbaarheid en de zuiverheid van het organisme te
testen door het inoculum op een geschikte agarplaat uit te strijken en dit onder de juiste omstandigheden te incuberen. Isoleer
de kolonies opnieuw en voer een nieuwe test uit als er twee of meer soorten kolonies aanwezig zijn op de zuiverheidsplaat.
Biochemische overlays
1. Gebruik een druppelflesje om de ARG- en URE-wells te bedekken met minstens 3 druppels minerale olie. (Deze wells
zijn onderstreept op de panels.)
2. De media in de wells moeten geheel worden bedekt met minerale olie, maar de olie mag niet overlopen.
C29870–AD
5 CFU/mL bij de laatste testconcentraties.
Uiteindelijk moet er een wellconcentratie van 3-7 x
295 of 339
Rehydrateer met 115 ± 10 μL
1 De