Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 62

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Etiquetas de código de barras (B1018-129)
Tapas para las bandejas WalkAway (B1018-18)
PROCEDIMIENTO
Preparación del panel
1. Extraiga los paneles que se van a utilizar del lugar en el que se conservan. No los utilice si se ve alterada la integridad
del envase (si no está sellado, o si está perforado o desgarrado).
2. Corte la bolsa para abrirla y retire el panel. Si estaba almacenado en el refrigerador, extraer inmediatamente el panel
de la bolsa de aluminio.
3. No deben utilizarse los paneles en caso de existir cualquiera de las condiciones siguientes:
A. El desecador no está presente o está dañado.
B. Los pocillos del panel están descoloridos (p. ej., PHO, distintos antimicrobianos).
4. Deje que los paneles se atemperen a temperatura ambiente antes de rehidratarlos. Los paneles se pueden apilar con
un panel cubridor encima. Todos los paneles deben utilizarse el mismo día, en caso contrario deben desecharse.
Preparación del inóculo
CLSI recomienda revisar periódicamente sus densidades de inóculo realizando recuentos de las colonias. Consulte las
recomendaciones sobre el recuento de colonias en el documento M07-A10 de CLSI. Los resultados esperados para E. coli
ATCC 25922 deben aproximarse bastante al valor de 5 x 10
usuario debe prestar especial atención durante la preparación del inóculo, particularmente con los métodos manuales que
dependen de técnicas como el sistema Prompt o que el inóculo se prepare sin la ayuda de un dispositivo fotométrico.
Nota: no se admiten las técnicas de fase logarítmica y estacionaria con los productos MicroScan.
1. Técnica estándar de turbidez: método de inóculo principal
La técnica estándar de turbidez se recomienda para la inoculación directa de todos los cocos aerobios grampositivos o
para la detección de los estafilococos resistentes a meticilina.
A. Usando un aplicador estéril, un hisopo o un asa bacteriológica, toque la superficie de 4–5 colonias grandes o
5–10 colonias pequeñas morfológicamente similares y bien aisladas de un cultivo de 18–24 horas en placa de
agar no inhibitorio.
B. Emulsione en 3 mL de agua para inóculo (agua desionizada esterilizada en autoclave).
C. Tape bien y agite la suspensión durante 2–3 segundos. La turbidez final debe ser equivalente al estándar de
turbidez de McFarland 0,5. Puede conseguirse una turbidez equivalente utilizando un turbidímetro de MicroScan
con un intervalo de 0,08 ± 0,02.
D. Pipetear 0,1 mL (100 μL) de la suspensión estandarizada en 25 mL de agua para inóculo con PLURONIC. Tape
bien. Invierta entre 8 y 10 veces para mezclar.
2. Sistema Prompt
El sistema Prompt puede utilizarse para cocos grampositivos de crecimiento más rápido. Consulte Prompt Inoculation
Procedural Manual (Manual de procedimiento de inoculación con Prompt) para utilizar el sistema Prompt de forma
adecuada.
Nota: utilizar con precaución. Se puede producir una inoculación deficiente si se usan microorganismos que no cumplen
los requisitos de tamaño, lo que puede ocasionar resultados incorrectos en las pruebas de sensibilidad e identificación.
Además, el método Prompt puede generar recuentos elevados de las colonias de estafilococos, posiblemente superiores
al intervalo de CLSI esperado. Los recuentos de colonias elevados pueden influir negativamente en los resultados de
antibióticos afectados por el inóculo. Consultar la sección Limitaciones si se sabe que los antimicrobianos dependen
del inóculo.
Rehidratación e inoculación del panel
La rehidratación e inoculación se realiza con el sistema RENOK con Inoculators-D (B1013-4). Consultar RENOK Operator's
Manual (Manual del operador de RENOK). Si se utiliza otro sistema, rehidratar con 115 ±10 μL de agua para inóculo
(PLURONIC). Se debe obtener una concentración final en el pocillo de 3-7 x 10
pureza del microorganismo analizado, debe prepararse una placa de pureza extendiendo el inóculo en una placa de agar
apropiada e incubando en las condiciones adecuadas. Si la placa de pureza presenta dos o más tipos de colonias, vuelva
a aislar las colonias y repita la prueba.
Recubrimiento de pruebas bioquímicas
1. Con una botella cuentagotas, cubrir los pocillos ARG y URE con al menos 3 gotas de aceite mineral. (Estos pocillos
aparecen subrayados en el panel.)
C29870–AD
UFC/mL para las concentraciones finales de la prueba.
5
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5 UFC/mL. Para asegurar la viabilidad y
El
1