Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 92

PROSEDYRE
Klargjøring av panel
1. Ta panelene som skal brukes, ut fra oppbevaringsstedet. Ikke bruk dem hvis emballasjen er skadet (brutt forsegling,
punktert eller tom).
2. Klipp opp posen, og ta ut panelet. Hvis panelet er oppbevart i kjøleskap, tar du det straks ut fra folieposen.
3. Paneler skal ikke brukes hvis noen av følgende forhold forekommer:
A. Tørkemiddel er ikke til stede eller er brutt.
B. Panelbrønner er misfarget (f.eks. PHO, forskjellige antimikrobielle midler).
4. La panelene nå romtemperatur før rehydrering. Panelene kan stables med et rent dekselbrett øverst. Alle åpnede
paneler skal brukes samme dag eller kastes.
Klargjøring av inokulum
CLSI anbefaler at du sjekker tettheten til inokulumet ved jevne mellomrom, ved å utføre kolonitellinger. Se CLSI-dokument
M07-A10 for anbefalte kolonitellinger. De forventede resultatene for E. coli ATCC 25922 skal være omtrent tilsvarende
5 x 10 5 CFU/mL for de endelige testkonsentrasjonene.
av inokulum, spesielt med manuelle metoder som er avhengige av bruk av riktig teknikk, f.eks. Prompt-system eller inokulum
som klargjøres uten hjelp av en fotometrisk enhet.
Merk: Log- og stasjonær fase-teknikker støttes ikke med MicroScan-produkter.
1. Turbiditetsstandardteknikk – primær inokulummetode
Turbiditetsstandardteknikken anbefales for direkte inokulering av alle aerobe gram-positive kokker eller for måling av
meticillinresistente stafylokokker.
A. Berør overflaten av 4–5 store eller 5–10 små morfologisk like, godt isolerte kolonier fra en 18–24 timers,
ikke-hemmende agarplate ved bruk av en steril påføringspinne, inokuleringsøse eller pensel.
B. Emulger i 3 mL inokulumvann (autoklavert, avionisert vann).
C. Lukk godt og bruk vorteksmikser til å blande suspensjonen i 2–3 sekunder. Den endelige turbiditeten bør være den
samme som en 0,5 McFarland-turbiditetsstandard. En tilsvarende turbiditet kan oppnås ved hjelp av en MicroScan
turbiditetsmåler med et område på 0,08 ± 0,02.
D. Pipetter 0,1 mL (100 μL) av den standardiserte suspensjonen i 25 mL inokulumvann med PLURONIC. Sett korken
godt på. Vend 8–10 ganger for å blande.
2. Prompt-system
Prompt-systemet kan brukes for de hurtigere voksende gram-positive kokkene. Se Prompt Inoculation procedural
manual (Prosedyrehåndbok for Prompt-inokulering) for riktig bruk av Prompt-systemet.
Merk: Brukes med forsiktighet.
størrelse, og kan føre til feil følsomhets- og identifikasjonstestresultater. Stafylokokk-kolonitellinger kan også bli høyere
med Prompt-metoden og kan være større enn det CLSI-forventede området. Forhøyede kolonitellinger kan påvirke
antibiotikaresultater som påvirkes av inokulum. Se avsnittet Begrensninger for antimikrobielle midler som er kjent for å
være inokulumavhengige.
Panelrehydrering/inokulering
Rehydrering og inokulering utføres ved hjelp av RENOK-systemet med Inoculators-D (B1013-4). Se RENOK Operator's
Manual (Brukerhåndbok for RENOK) for bruksanvisninger. Hvis et annet system brukes, rehydrer med 115 µL ± 10 µL
inokulumvann (PLURONIC). En endelig brønnkonsentrasjon på 3–7 x 10
og renhet i organismen som testes, bør en renhetsskål klargjøres ved å legge en stripe av inokulumet på en egnet agarskål
og inkubere under egnede forhold. Hvis det er to eller flere kolonityper på renhetsskålen, isoleres koloniene på nytt og testes
om igjen.
Biokjemiske overlegg
1. Bruk en dråpetellerflaske til å legge minst 3 dråper mineralolje over ARG- og URE-brønnene. (Disse brønnene er
understreket på panelet.)
2. Mediet i brønnene må være helt dekket av mineraloljen, men brønnene skal ikke være overfylt.
MERK: WalkAway SI- og WalkAway plus-instrumenter (og WalkAway-instrumenter oppgradert med den automatiske
oljeoverleggsfunksjonen) tilsetter olje automatisk i de riktige brønnene.
Inkubasjon
1. Paneler kan inkuberes i et WalkAway-system eller inkuberes frakoblet med følgende prosedyre:
A. Stable panelene i grupper på 3–5 for å sikre jevn varmefordeling under inkubasjon.
C29870–AD
1 Brukeren må være svært oppmerksom i forbindelse med klargjøring
Underinokulering kan forekomme med organismer som ikke oppfyller kravet til
92 of 339
CFU/mL bør oppnås. For å sikre levedyktighet
5