Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 50

stafilococchi, quando le MIC dell'oxacillina sono > 2 μg/mL per S. aureus e S. lugdunensis, o quando l'oxacillina
è ≥ 0,5 μg/mL per altri stafilococchi coagulasi negativi.
Per gli stafilococchi coagulasi negativi diversi da S. lugdunensis con CfxS ≤ 4 μg/mL e MIC dell'oxacillina 0,5,
lo stato mecA è negativo e l'interpretazione dell'oxacillina sarà riportata come S*; quando CfxS è ≤ 4 μg/mL e
la MIC dell'oxacillina è 1 o 2, lo stato mecA è variabile e deve essere controllato prima di refertare questi agenti
antimicrobici come sensibili.
H. Per i pozzetti contenenti aminoglucosidi (es. gentamicina) e macrolidi (es. eritromicina), la crescita potrebbe non
essere consistente come quella nel pozzetto di controllo della crescita a causa di differenze nel brodo di coltura di
base. Prestare attenzione nell'interpretazione di questi risultati.
I. È possibile osservare un "effetto di trascinamento" con alcune combinazioni farmaco/organismo. Il trascinamento
con trimetoprim/sulfametossazolo (T/S) con l'utilizzo del sistema di reidratazione/inoculazione RENOK è dovuto
alla concentrazione dell'inoculo. Il punto finale deve essere letto come la concentrazione più bassa che, rispetto
al pozzetto di crescita, mostri:
a. Riduzione della crescita (T/S) dell'80% circa
b. Un bottone bianco di diametro inferiore a 2 mm oppure
c. Un bottone bianco semi-trasparente.
J. È possibile osservare un leggero velo di crescita con gli antimicrobici fluorochinoloni (es.
norfloxacina, ofloxacina) utilizzando il metodo Prompt di inoculazione con gli stafilococchi, compreso l'organismo
di controllo qualità S. aureus ATCC 29213. Questo fenomeno NON deve essere interpretato come crescita.
K. Se un organismo non cresce nel pozzetto di crescita senza timidina (TFG), per T/S non deve essere riportata
alcuna MIC.
6. Lettura dei substrati di identificazione
A. Leggere tutti i substrati di identificazione su uno sfondo bianco, ad eccezione di CV, MS, NOV, OPT, NACL e BAC
per i quali si deve utilizzare uno sfondo nero (a illuminazione indiretta).
B. I risultati IDX e PHO vengono registrati dopo 16–20 ore di incubazione.
C. I pannelli con PGT negativa e meno di 3 carboidrati positivi devono essere reincubati per altre 24 ore prima della
lettura e dell'identificazione finali.
D. È necessario aggiungere reagenti dopo 16–20 ore solo nei pannelli con 3 carboidrati o reazione PGT positiva.
Dopo 40–44 ore, aggiungere reagenti indipendentemente dal numero di test positivi.
E. Prima di aggiungere i reagenti, registrare tutte le reazioni positive.
F. Aggiungere i reagenti nel modo seguente:
1) Aggiungere al pozzetto VP 1 goccia di idrossido di potassio (KOH) al 40% e 1 goccia di α-naftolo al 5%. Attendere
almeno 20 minuti affinché si verifichi la reazione VP, quindi leggere i risultati.
2) Aggiungere 1 goccia di acido sulfanilico allo 0,8% e 1 goccia di N,N-dimetil-alfa-naftilamina allo 0,5% nel pozzetto
NIT. Attendere almeno 5 minuti affinché si verifichi la reazione NIT, quindi leggere i risultati.
3) Aggiungere 2 gocce di reagente per peptidasi nel pozzetto PYR. Attendere 2 minuti prima di leggere i risultati.
G. Per assistenza nell'interpretazione biochimica, consultare la sezione RISULTATI.
RISULTATI
1. Risultati biochimici
A. Interpretazioni biochimiche
Pozzetto
CV
MS
NOV
OPT
NACL
BAC
NIT
PGR
PHO
PGT
IDX
C29870–AD
Reagente
Aggiungere 1 goccia di acido sulfanilico allo 0,8% e 1 goccia di
N,N-dimetil-alfa-naftilamina allo 0,5%. Attendere 5 minuti affinché si verifichi
la reazione.
Tutte le sfumature di giallo devono essere
interpretate come positive. Utilizzare il
pozzetto NOV come controllo negativo.
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ciprofloxacina,
Positivo Negativo
Crescita Assenza di crescita
Da rosa a rosso Trasparente
(incolore), può
essere di colore
rosa molto chiaro
Giallo Trasparente
(incolore)
Da blu a Trasparente
grigio/precipitato (incolore) o
precipitato bianco