Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 49

A. Per garantire una distribuzione termica uniforme durante l'incubazione, impilare i pannelli in gruppi di 3–5.
B. Posizionare un coperchio pulito sopra ciascun gruppo di pannelli per impedire l'evaporazione. I coperchi possono
essere riutilizzati. Non decontaminare i coperchi con alcool. Per pulirli è possibile utilizzare acqua e sapone.
Risciacquare bene e lasciar asciugare all'aria.
C. Incubare i pannelli per 16–20 ore a 35 °C in un incubatore non a CO
Lettura dei pannelli
È possibile leggere manualmente i pannelli mediante il visualizzatore per microdiluizioni MicroScan e registrare i risultati su
uno strumento MicroScan (sistemi autoSCAN-4 e WalkAway). Per informazioni sulla lettura dei pannelli con gli strumenti
MicroScan, consultare LabPro Operator's Guide (Guida per l'operatore del sistema LabPro).
1. Dopo 16–20 ore di incubazione, rimuovere i pannelli dall'incubatore.
2. Pulire la parte inferiore del pannello con un panno privo di lanugine per rimuovere eventuali detriti o condensa.
3. Leggere i pannelli solo se il pozzetto di controllo è trasparente e il pozzetto di controllo della crescita è torbido. Non
leggere gli antimicrobici se il pozzetto di controllo è torbido o se non è presente crescita nel pozzetto di crescita. La
crescita nei pozzetti appare come torbidità, che può assumere l'aspetto di un velo bianco su tutto il pozzetto, di un
bottone bianco al centro del pozzetto o di una crescita granulare fine in tutto il pozzetto. Una crescita inadeguata è
definita da un lieve alone biancastro nel pozzetto o dalla trasparenza del brodo.
4. Se i risultati vengono letti manualmente, registrarli sul foglio di lavoro appropriato.
5. Lettura delle sensibilità agli antimicrobici (MIC)
A. Leggere tutti gli antimicrobici, CV, MS, NOV, OPT, NACL e BAC su uno sfondo nero (a illuminazione indiretta).
B. Eseguire il test della β-lattamasi sugli stafilococchi con una MIC della penicillina di ≤ 0,12 μg/mL.
C. Registrare i risultati MIC come indicato di seguito:
a. Dopo 16–20 ore di incubazione, registrare la MIC come la concentrazione di antimicrobico più bassa in grado
di inibire la crescita.
b. Quando la crescita si verifica a tutte le concentrazioni di antimicrobico, il valore MIC viene registrato come
maggiore (>) della concentrazione massima.
c. Quando non si verifica alcuna crescita a nessuna concentrazione di antimicrobico, il valore MIC viene
registrato come inferiore o uguale (≤) alla concentrazione minima.
d. Un pozzetto trasparente in una serie di pozzetti con crescita (ad es. crescita a 1, 2 e 8 µg/mL, ma non a
4 µg/mL) è detto pozzetto saltato e deve essere ignorato.
e. Una crescita puntiforme in pozzetti isolati indica contaminazione. È necessario ripetere il test.
f. Per gli stafilococchi con oxacillina, qualsiasi crescita deve essere considerata significativa.
D. Il rilevamento accurato della resistenza richiede tempi di incubazione prolungati nei casi seguenti:
Incubazione
24 ore
24–48 ore
1. L'incubazione di 24 ore non è richiesta per la specie Staphylococcus per i pannelli contenenti il pozzetto di screening con cefoxitina.
E. Le prestazioni della vancomicina sui pannelli MicroScan sono state confrontate con il metodo della microdiluizione
in brodo raccomandato da CLSI. I risultati della vancomicina con stafilococchi dopo un'incubazione di 16–20 ore
(18–20 ore per le letture effettuate con lo strumento autoSCAN-4) erano paragonabili a quelli ottenuti a 24 ore con
il metodo di riferimento.
F. Per i pannelli contenenti solo oxacillina: gli stafilococchi devono essere refertati come resistenti (a prescindere
dalla MIC) agli antimicrobici ampicillina, amoxicillina/potassio clavulanato, ampicillina/sulbactam, ertapenem,
imipenem, meropenem, penicillina, piperacillina/tazobactam, ticarcillina/potassio clavulanato e cefalosporine
(eccetto ceftarolina) quando le MIC dell'oxacillina sono > 2 μg/mL per S. aureus e S. lugdunensis e ≥ 0,5 μg/mL
per stafilococchi coagulasi negativi diversi da S. lugdunensis.
G. Per i pannelli contenenti pozzetti di screening sia con oxacillina sia con cefoxitina (CfxS): gli stafilococchi devono
essere riportati come resistenti (a prescindere dalla MIC) agli antimicrobici ampicillina, amoxicillina/potassio
clavulanato, ampicillina/sulbactam, ertapenem, imipenem, meropenem, penicillina, piperacillina/tazobactam,
ticarcillina/potassio clavulanato e cefalosporine (eccetto ceftarolina) quando CfxS è > 4 μg/mL per tutti gli
C29870–AD
Organismo
Enterococchi
Stafilococchi
Streptococchi
Enterococchi
.
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Antimicrobici
Screening del sinergismo della
kanamicina
Oxacillina
1
Screening del sinergismo della
kanamicina
Sinergismo della streptomicina
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