Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 206

PROSEDÜR
Panel Hazırlığı
1. Kullanılacak panelleri saklama alanından çıkarın. Ambalaj bütünlüğü bozulmuşsa (açılmış, delinmiş ya da yırtılmış)
kullanmayın.
2. Poşeti keserek açın ve paneli çıkarın. Buzdolabında saklanmış olması durumunda paneli hemen folyo poşetten çıkarın.
3. Aşağıdaki durumların herhangi birinin söz konusu olması halinde paneller kullanılmamalıdır:
A. Nem alıcının mevcut olmaması ya da kırılmış olması durumunda.
B. Panel kuyucuklarının renginin bozulmuş olması durumunda (ör. PHO ve çeşitli antimikrobikler).
4. Rehidrasyon öncesinde panellerin oda sıcaklığına gelmesini bekleyin. Paneller, üzerlerine temiz bir Panel Kapağı
yerleştirilerek istiflenebilir. Açılmış olan tüm paneller aynı gün içinde kullanılmalı ya da atılmalıdır.
İnokülüm Hazırlığı
CLSI koloni sayımı yaparak inokülüm yoğunluğunun periyodik olarak kontrol edilmesini önermektedir. Koloni sayımı önerileri
için CLSI belgesi M07-A10'a başvurun. E. coli ATCC 25922 için beklenen sonuçlar, son test konsantrasyonları için 5 x
10 5 CFU/mL'ye çok yakın bir değer olmalıdır.
kullanıldığında veya inokülüm bir fotometrik cihaz olmadan hazırlandığında, inokülümün hazırlanması konusunda çok dikkatli
olmalıdır.
Not: Log ve Sabit faz teknikleri MicroScan ürünlerinde desteklenmez.
1. Türbidite Standardı Tekniği — Primer İnokülüm Yöntemi
Türbidite standardı tekniği tüm aerobik Gram pozitif kokların direkt inokülasyonu veya metisiline dirençli stafilokokların
tespiti için önerilir.
A. Steril bir aplikatör çubuğu, öze ya da temizleme çubuğu kullanarak 18-24 saatlik inhibe edici olmayan bir agar
petri kabındaki iyi düzeyde izole olmuş, morfolojik olarak benzer 5-10 küçük ya da 4-5 büyük koloninin yüzeyine
dokunun.
B. 3 mL İnokülüm Suyu (otoklavlanmış deiyonize su) içinde emülsifiye edin.
C. Kapağı sıkıca kapatın ve süspansiyonu 2-3 saniye vorteksle karıştırın. Son türbidite 0,5 McFarland Türbidite
Standardına eşdeğer olmalıdır. 0,08 ± 0,02 aralığına sahip bir MicroScan Türbidimetre kullanılarak eşdeğer bir
türbiditeye ulaşılabilir.
D. Standardize süspansiyonun 0,1 mL'sini (100 μL) pipetle 25 mL PLURONIC'li İnokülüm Suyuna aktarın. Sıkıca
kapatın. Karıştırmak için 8-10 defa ters çevirin.
2. Prompt Sistemi
Daha hızlı üreyen Gram pozitif koklar için Prompt Sistemi kullanılabilir. Prompt Sisteminin doğru kullanımı için Prompt
Inoculation Procedural Manual (Prompt İnokülasyon Prosedür Kılavuzu) belgesine bakın.
Not: Dikkatli kullanın. Boyut şartını karşılamayan organizmalarda yetersiz inokülasyon oluşabilir ve hatalı duyarlılık ve
tanımlama test sonuçlarının alınmasına neden olabilir. Ayrıca, stafilokok koloni sayımları Prompt yöntemiyle yükselebilir
ve CLSI beklenen aralığından daha fazla olabilir. Yüksek koloni sayımları inokülümün etkilediği antibiyotik sonuçları
üzerinde olumsuz etki oluşturabilir. İnokülüme bağımlı olduğu bilinen antimikrobiyaller için Sınırlamalar bölümüne
başvurun.
Panel Rehidrasyonu/İnokülasyonu
Rehidrasyon ve inokülasyon, Inoculators-D (B1013-4) ile RENOK sistemi kullanılarak gerçekleştirilir. Kullanım için RENOK
Operator's Manual (RENOK Kullanım Kılavuzu) belgesine başvurun. Alternatif bir sistem kullanıldığı takdirde, 115 ±10 μL
İnokülüm Suyu (PLURONIC) ile rehidrasyon uygulayın. 3-7 x 10
Test edilen organizmanın canlılığını ve saflığını garanti altına almak için inokülümün uygun bir agar petri kabına uygulanıp
uygun koşullar altında inkübe edilmesiyle bir saflık petri kabı hazırlanmalıdır. Saflık petri kabında iki ya da daha fazla koloni
tipi mevcut olduğu takdirde kolonileri yeniden izole edin ve testi yeniden uygulayın.
Biyokimyasal Kaplamalar
1. Bir damlatma şişesi kullanarak ARG ve URE kuyucuklarını en az 3 damla mineral yağı ile kaplayın. (Bu kuyucukların
panelde altı çizilidir.)
2. Kuyucuklardaki ortamlar mineral yağ ile tamamen kaplanmalıdır ancak yağ kuyucuklardan taşmamalıdır.
NOT: WalkAway SI ve WalkAway plus cihazları (ve otomatik yağ kaplama özelliği ile yükseltilmiş WalkAway cihazları)
uygun kuyucuklara otomatik olarak yağ ilave eder.
İnkübasyon
1. Paneller, bir WalkAway Sisteminde inkübe edilebilir veya aşağıdaki adımlar uygulanarak bağlantısız şekilde inkübe
edilebilir:
C29870–AD
1 Kullanıcı, özellikle Prompt Sistemi gibi tekniğe dayanan manuel yöntemler
CFU/mL'lik bir son kuyucuk konsantrasyonu elde edilmelidir.
5
206 of 339