Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 107

κατάλληλο τρυβλίο με άγαρ και επωάζοντάς το υπό κατάλληλες συνθήκες. Εάν υπάρχουν δύο ή περισσότεροι τύποι αποικιών
στο τρυβλίο καθαρότητας, απομονώστε εκ νέου τις αποικίες και επανεκτελέστε την εξέταση.
Βιοχημικές επιστρώσεις
1. Χρησιμοποιώντας μια φιάλη σταγονόμετρου, επιστρώστε τα βοθρία ARG και URE με τουλάχιστον 3 σταγόνες
παραφινέλαιου. (Τα βοθρία αυτά είναι υπογραμμισμένα στην πλάκα.)
2. Τα μέσα στα βοθρία πρέπει να καλύπτονται πλήρως με παραφινέλαιο, το οποίο όμως δεν θα πρέπει να υπερχειλίζει τα
βοθρία.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Τα όργανα WalkAway SI και WalkAway plus (και τα όργανα WalkAway που έχουν αναβαθμιστεί με τη
δυνατότητα αυτοματοποιημένης επίστρωσης ελαίου) προσθέτουν αυτόματα έλαιο στα κατάλληλα βοθρία.
Επώαση
1. Οι πλάκες μπορούν να επωαστούν σε σύστημα WalkAway ή να επωαστούν εκτός αναλυτή, με χρήση των παρακάτω
βημάτων:
A. Για να διασφαλιστεί ομοιόμορφη κατανομή θερμότητας κατά τη διάρκεια της επώασης, στοιβάξτε τις πλάκες σε
ομάδες των 3–5.
B. Τοποθετήστε μια καθαρή καλυπτρίδα πάνω σε κάθε ομάδα πλακών για να αποτραπεί η εξάτμιση. Οι καλυπτρίδες
μπορούν να επαναχρησιμοποιηθούν. Μην απολυμαίνετε τις καλυπτρίδες με αλκοόλη. Μπορείτε να τις καθαρίσετε
με σαπούνι και νερό. Εκπλύνετε καλά και αφήστε τις να στεγνώσουν φυσικά.
C. Αφήστε τις πλάκες να επωαστούν για 16–20 ώρες στους 35 °C, σε μονάδα επώασης που λειτουργεί χωρίς CO
Ανάγνωση των πλακών
Η ανάγνωση των πλακών μπορεί να γίνει μη αυτόματα, με χρήση του συστήματος παρακολούθησης μικροαραίωσης MicroScan
και τα αποτελέσματα καταγράφονται στο σύστημα οργάνων MicroScan (συστήματα autoSCAN-4 και WalkAway). Για οδηγίες
σχετικά με την ανάγνωση των πλακών με το σύστημα οργάνων MicroScan, ανατρέξτε στο LabPro Operator's Guide (Εγχειρίδιο
χειρισμού του LabPro).
1. Μετά από 16–20 ώρες επώασης, αφαιρέστε τις πλάκες από τη μονάδα επώασης.
2. Σκουπίστε τον πυθμένα της πλάκας με ένα ύφασμα που δεν αφήνει χνούδι, για να αφαιρέσετε τυχόν προϊόντα
συμπύκνωσης υδρατμών ή υπολείμματα που ενδέχεται να υπάρχουν.
3. Η ανάγνωση των πλακών γίνεται μόνο εάν το βοθρίο του μάρτυρα είναι διαυγές και το βοθρίο μάρτυρα ανάπτυξης είναι
θολερό. Μην προβαίνετε σε ανάγνωση των αντιμικροβιακών παραγόντων εάν το βοθρίο του μάρτυρα είναι θολερό ή εάν
δεν υπάρχει ανάπτυξη στο βοθρίο ανάπτυξης. Η ανάπτυξη στα βοθρία εμφανίζεται ως θολερότητα, η οποία μπορεί να
λάβει τη μορφή λευκής θόλωσης σε ολόκληρο το βοθρίο, λευκού «κομβίου» στο κέντρο του βοθρίου ή λεπτής κοκκιώδους
ανάπτυξης σε ολόκληρο το βοθρίο. Ως ανεπαρκής ανάπτυξη ή απουσία ανάπτυξης ορίζεται η ελαφρά λευκότητα στο
βοθρίο ή η διαύγεια του ζωμού.
4. Εάν πραγματοποιείται μη αυτόματη ανάγνωση των αποτελεσμάτων, καταγράψτε τα αποτελέσματα στο κατάλληλο φύλλο
εργασίας.
5. Ανάγνωση της ευαισθησίας σε αντιμικροβιακούς παράγοντες (MIC)
A. Η ανάγνωση όλων των αντιµικροβιακών παραγόντων, των CV, MS, NOV, OPT, NACL και BAC πρέπει να γίνεται
έναντι μαύρου (έμμεσα φωτισμένου) υποβάθρου.
B. Πραγματοποιήστε δοκιμασία β-λακταμάσης για σταφυλόκοκκους με MIC πενικιλλίνης ≤0,12 μg/mL.
C. Καταγράψτε τα αποτελέσματα MIC ως εξής:
a. Μετά από 16–20 ώρες επώασης, καταγράψτε την τιμή MIC ως τη χαμηλότερη συγκέντρωση αντιμικροβιακού
παράγοντα στην οποία εμφανίζεται αναστολή της ανάπτυξης.
b. Όταν παρουσιαστεί ανάπτυξη σε όλες τις συγκεντρώσεις ενός αντιμικροβιακού παράγοντα, η τιμή MIC
καταγράφεται ως μεγαλύτερη από (>) την ανώτατη συγκέντρωση.
c. Όταν δεν παρουσιαστεί ανάπτυξη σε καµία από τις συγκεντρώσεις των αντιµικροβιακών παραγόντων, η MIC
καταγράφεται ως µικρότερη από ή ίση με (≤) τη χαμηλότερη συγκέντρωση.
d. Ένα διαυγές βοθρίο σε μια σειρά βοθρίων ανάπτυξης, π.χ. ανάπτυξη στα 1, 2 και 8 μg/mL, αλλά όχι στα
4 μg/mL, ονομάζεται βοθρίο που έχει παραλειφθεί και θα πρέπει να αγνοείται.
e. Η ανάπτυξη κηλίδων σε απομονωμένα βοθρία υποδεικνύει μόλυνση.
επαναλαμβάνεται.
f. Για σταφυλόκοκκους με οξακιλλίνη, κάθε ανάπτυξη πρέπει να θεωρείται σημαντική.
D. Για την ακριβή ανίχνευση της ανθεκτικότητας, απαιτούνται παρατεταμένοι χρόνοι επώασης για τα ακόλουθα:
C29870–AD 107 of 339
1
Η εξέταση θα πρέπει να
.
2