Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 310

QUY TRÌNH
Chuẩn bị Panel
1. Lấy panel cần sử dụng ra khỏi nơi bảo quản. Không sử dụng nếu bao bì không còn nguyên vẹn (không kín, thủng hoặc
rách).
2. Cắt mở túi và lấy panel ra. Nếu bảo quản trong tủ lạnh, hãy lấy panel ngay ra khỏi túi màng kim loại.
3. Không sử dụng panel nếu tồn tại bất kỳ điều kiện nào sau đây:
A. Không có chất hút ẩm hoặc chất hút ẩm đã bị hỏng.
B. Các giếng trong panel bị biến màu (ví dụ: PHO, các chất kháng vi sinh vật khác nhau).
4. Để các panel về nhiệt độ phòng trước khi thủy hóa lại. Có thể xếp chồng các panel với điều kiện đặt một khay phủ sạch
lên trên. Phải sử dụng tất cả các panel đã mở trong ngày. Thải bỏ nếu không dùng hết.
Chuẩn bị môi trường cấy truyền
CLSI khuyến nghị kiểm tra định kỳ mật độ của môi trường cấy truyền bằng cách tiến hành các lần đếm khuẩn lạc. Tham khảo
tài liệu M07-A10 của CLSI để biết số lượng khuẩn lạc theo khuyến nghị. Kết quả dự kiến cho E. coli ATCC 25922 phải gần
xấp xỉ 5 x 10 CFU/mL đối với các nồng độ xét nghiệm cuối cùng.
5
đặc biệt khi sử dụng phương pháp thủ công phụ thuộc vào kỹ thuật, chẳng hạn như Hệ thống Prompt, hoặc khi chuẩn bị môi
trường cấy truyền mà không sử dụng thiết bị đo sáng.
Lưu ý: Các sản phẩm MicroScan không hỗ trợ các kỹ thuật pha Logarit và pha Cân bằng.
1. Kỹ thuật chuẩn độ đục - Phương pháp chuẩn bị môi trường cấy truyền chính
Nên sử dụng kỹ thuật chuẩn độ đục để cấy truyền trực tiếp tất cả khuẩn cầu gram dương hiếu khí hoặc để nhận biết
staphylococci kháng methicillin.
A. Dùng que trét, que cấy đầu tròn hoặc bông tăm vô khuẩn chạm vào bề mặt của 4–5 khuẩn lạc lớn hoặc 5–10
khuẩn lạc nhỏ có hình thái tương đồng, được phân lập kỹ trên đĩa thạch không ức chế đã nuôi cấy 18–24 giờ.
B. Nhũ hóa trong 3 mL Nước cấy truyền (nước đã khử ion bằng cách hấp).
C. Đậy kín và lắc huyền phù trong 2–3 giây. Độ đục cuối cùng phải tương đương với độ đục của Chuẩn độ đục
McFarland 0,5. Có thể đạt được độ đục tương đương bằng cách sử dụng Máy đo độ đục MicroScan trong phạm
vi 0,08 ± 0,02.
D. Dùng ống pipet phân phối 0,1 mL (100 μL) huyền phù đã chuẩn hóa vào 25 mL Nước cấy truyền có PLURONIC.
Đóng chặt nắp. Đảo qua lại 8–10 lần để trộn.
2. Hệ thống Prompt
Có thể sử dụng Hệ thống Prompt để khuẩn cầu gram dương sinh trưởng nhanh hơn. Tham khảo Prompt Inoculation
procedural manual (Hướng dẫn quy trình Cấy truyền Prompt) để biết cách sử dụng đúng Hệ thống Prompt.
Lưu ý: Thận trọng khi sử dụng. Cấy truyền không đủ có thể xảy ra với các sinh vật không đáp ứng yêu cầu về kích thước,
có thể tạo ra kết quả xét nghiệm định danh và độ nhạy không chính xác. Ngoài ra, số lượng khuẩn lạc staphylococci
có thể gia tăng khi sử dụng phương pháp Prompt và có thể lớn hơn phạm vi dự kiến của CLSI. Số lượng khuẩn lạc gia
tăng có thể tác động bất lợi đến kết quả kháng sinh vốn bị ảnh hưởng bởi môi trường cấy truyền. Tham khảo phần Giới
hạn để biết các chất kháng vi sinh vật được biết đến là phụ thuộc vào môi trường cấy truyền.
Thủy hóa lại/Cấy truyền panel
Thủy hóa lại và cấy truyền được thực hiện bằng cách sử dụng hệ thống RENOK với Inoculator-D (B1013–4). Tham khảo
RENOK Operator's Manual (Hướng dẫn dành cho người vận hành hệ thống RENOK) để biết cách sử dụng. Nếu sử dụng hệ
thống tương tự khác, hãy thủy hóa lại với 115 ± 10 μL Nước cấy truyền (PLURONIC). Phải đạt được nồng độ cuối cùng của
giếng ở mức 3–7 X 10
5
khiết bằng cách quét môi trường cấy truyền vào đĩa thạch thích hợp và ủ trong các điều kiện thích hợp. Nếu đĩa thuần khiết
có hai hoặc nhiều loại khuẩn lạc, phải phân lập lại các khuẩn lạc và xét nghiệm lại.
Phủ chất sinh hóa
1. Dùng lọ nhỏ giọt để phủ các giếng ARG và URE bằng ít nhất 3 giọt dầu khoáng. (Các giếng này được gạch chân trên
panel.)
2. Phải phủ kín hoàn toàn môi trường trong các giếng bằng dầu khoáng, nhưng không được đổ tràn dầu khỏi các giếng.
LƯU Ý: Các thiết bị WalkAway SI và WalkAway plus (cũng như các thiết bị WalkAway được nâng cấp với tính năng phủ
dầu tự động) sẽ tự động thêm dầu vào các giếng phù hợp.
Ủ
1. Có thể ủ các panel trong Hệ thống WalkAway hoặc ủ ngoài hệ thống theo các bước sau:
A. Để đảm bảo phân phối nhiệt đồng đều trong khi ủ, hãy chồng các panel theo các nhóm 3–5 panel.
C29870–AD
CFU/mL. Để đảm bảo khả năng sống và độ tinh khiết của sinh vật xét nghiệm, phải chuẩn bị đĩa tinh
Người dùng phải chú ý khi chuẩn bị môi trường cấy truyền,
1
310 of 339