Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 166

B. Na každou skupinu panelů nasaďte čistý kryt, abyste zabránili odpařování. Kryty lze používat opakovaně.
Neprovádějte dekontaminaci krytů alkoholem. Je možné čistit je mýdlovou vodou. Dobře je opláchněte a nechte
je uschnout na vzduchu.
C. Inkubujte panely 16–20 hodin při teplotě 35 °C v inkubátoru, který není CO
Vyhodnocování panelů
Panely lze vyhodnocovat manuálně pomocí mikrodilučního prohlížeče MicroScan a zaznamenaných výsledků nebo
pomocí přístrojového vybavení MicroScan (systémy autoSCAN-4 a WalkAway). Pokyny pro vyhodnocování panelů pomocí
přístrojového vybavení MicroScan naleznete v dokumentu LabPro Operator's Guide (Návod k obsluze přístroje LabPro).
1. Po 16–20hodinové inkubaci vyjměte panely z inkubátoru.
2. Případnou zkondenzovanou tekutinu nebo odpad přítomný na spodku panelů otřete látkou, která nepouští vlákna.
3. Vyhodnoťte panely, pouze je-li kontrolní jamka čirá a jamka kontroly růstu vykazuje zákal. Nevyhodnocujte antimikrobika,
pokud je zakalená kontrolní jamka nebo pokud v růstové jamce nedošlo k nárůstu. Nárůst v jamkách vypadá jako
zákal, který se může vyskytovat ve formě bílého zákalu v celé jamce, jako bílá skvrna ve středu jamky nebo jako jemný
granulární nárůst v celé jamce. Nedostatečný nárůst je definován čirostí živné půdy nebo mírným zběláním jamky.
4. Pokud jsou výsledky odečítány manuálně, zaznamenejte je do příslušného pracovního listu.
5. Odečítání citlivosti na antimikrobika (hodnoty MIC)
A. Vyhodnoťte všechna antimikrobika, CV, MS, NOV, OPT, NACL a BAC vzhledem k černému (nepřímo osvětlenému)
pozadí.
B. Proveďte test na β-laktamázu pro stafylokoky s MIC penicilinu ≤ 0,12 μg/ml.
C. Výsledky MIC zaznamenejte následovně:
a. Po 16–20hodinové inkubaci zaznamenejte hodnotu MIC jako nejnižší koncentraci antimikrobika, která
vykazuje inhibici růstu.
b. Pokud dojde k nárůstu ve všech koncentracích antimikrobika, zaznamenává se hodnota MIC jako „vyšší než
nejvyšší koncentrace" (>).
c. Pokud nedojde k nárůstu v žádné koncentraci antimikrobika, zaznamenává se hodnota MIC jako „menší než
nebo rovna nejnižší koncentraci" (≤).
d. Čirá jamka v sérii jamek s nárůstem (např. nárůst v 1, 2 a 8 µg/ml, ale ne ve 4 µg/ml) se nazývá vynechaná
jamka a neměla by se brát v úvahu.
e. Bodový nárůst v izolovaných jamkách značí kontaminaci. Test by se měl zopakovat.
f. V případě stafylokoků s oxacilinem by jakýkoli růst měl být považován za významný.
D. Přesná detekce rezistence vyžaduje prodloužení inkubační doby u následujících položek:
Inkubace
24 hodin
24–48 hodin
1. 24hodinová inkubace není nutná u druhů Staphylococcus v případě panelů obsahujících screeningovou jamku cefoxitinu.
E. Účinnost vankomycinu na panelech MicroScan byla porovnána s metodami mikroředění živné půdy
doporučovanými CLSI. Výsledky vankomycinu se stafylokoky po 16–20 hodinách inkubace (18–20 hodin
v případě odečítání pomocí přístroje autoSCAN-4) byly srovnatelné s výsledky získanými po 24 hodinách
s použitím referenční metody.
F. V případě panelů obsahujících pouze oxacilin: stafylokoky by měly být ohlašovány jako rezistentní (bez
ohledu na MIC) na antimikrobika ampicilin, amoxicilin / klavulanát draselný, ampicilin/sulbaktam, ertapenem,
imipenem, meropenem, penicilin, piperacilin/tazobaktam, tikarcilin / klavulanát draselný a cefalosporin (s výjimkou
ceftarolinu), jsou-li MIC oxacilinu >2 μg/ml pro S. aureus a S. lugdunensis a ≥ 0,5 μg/ml pro stafylokoky negativní
na koagulázu mimo S. lugdunensis.
G. V případě panelů obsahujících oxacilin i screeningové jamky cefoxitinu (CfxS): stafylokoky by měly být
ohlašovány jako rezistentní (bez ohledu na MIC) na antimikrobika ampicilin, amoxicilin / klavulanát draselný,
ampicilin/sulbaktam, ertapenem, imipenem, meropenem, penicilin, piperacilin/tazobaktam, tikarcilin / klavulanát
draselný a cefalosporin (s výjimkou ceftarolinu), je-li CfxS >4 μg/ml pro všechny stafylokoky nebo jsou-li hodnoty
C29870–AD
Organismus
Enterokoky
Stafylokoky
Streptokoky
Enterokoky
Antimikrobika
Screeningový test synergie
kanamycinu
Oxacilin 1
Screeningový test synergie
kanamycinu
Synergie streptomycinu
166 of 339
inkubátorem.
2
1