Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 280

Papel de etiqueta de código de barras (B1018-129)
Tampas para bandejas WalkAway (B1018-18)
PROCEDIMENTO
Preparação de painel
1. Retire os painéis a serem utilizados do local de armazenamento. Não utilize-os se a integridade da embalagem estiver
comprometida (sem lacre, perfurada ou rasgada).
2. Corte a embalagem para abri-la e retire o painel. Se armazenado em refrigerador, retire o painel imediatamente da
bolsa de alumínio.
3. Os painéis não devem ser utilizados caso ocorra qualquer uma das seguintes condições:
A. O dessecante não está presente ou está quebrado.
B. Os poços do painel estão desbotados (p. ex., PHO, diversos agentes antimicrobianos).
4. Deixe os painéis se equilibrarem até a temperatura ambiente antes da reidratação. Os painéis podem ser empilhados
com uma bandeja de cobertura limpa na parte superior. Todos os painéis abertos devem ser utilizados no mesmo dia
ou descartados.
Preparação do inóculo
O CLSI recomenda a verificação periódica das densidades do seu inóculo por meio de contagem de colônias. Consulte o
documento M07-A10 do CLSI para obter recomendações sobre contagem de colônias. Os resultados esperados para E. coli
ATCC 25922 devem ficar bem próximos de 5 X 10
bastante atenção à preparação do inóculo, especialmente com métodos manuais que dependam de técnica, como o Sistema
Prompt, ou ao inóculo preparado sem o auxílio de um dispositivo fotométrico.
Nota: os produtos MicroScan não oferecem suporte às técnicas de fase logarítmica e fase estacionária.
1. Técnica padrão de turbidez — Método de inoculação primária
A técnica padrão de turbidez é recomendada para inoculação direta de todos os cocos Gram-positivos aeróbios ou para
a detecção de estafilococos resistentes à meticilina.
A. Utilizando um aplicador, uma alça ou um swab estéril, toque na superfície de 4–5 colônias grandes ou
5–10 colônias pequenas morfologicamente semelhantes e bem isoladas de uma placa de ágar não inibitória de
18–24 horas.
B. Emulsione em 3 mL de água de inóculo (água deionizada em autoclave).
C. Tampe firmemente e agite a suspensão em vórtex por 2–3 segundos. A turbidez final deve ser equivalente àquela
de um padrão de turbidez McFarland 0,5. Uma turbidez equivalente pode ser atingida com o uso de um medidor
de turbidez MicroScan, na faixa de 0,08 ± 0,02.
D. Pipete 0,1 mL (100 μL) da suspensão padronizada em 25 mL de água de inóculo com PLURONIC. Tampe bem.
Inverta de 8–10 vezes para misturar.
2. Sistema Prompt
O Sistema Prompt pode ser usado para os cocos Gram-positivos de crescimento mais rápido. Consulte o Prompt
Inoculation Procedural Manual (Manual de procedimentos de inoculação do Prompt) para obter informações sobre o
uso adequado do Sistema Prompt.
Nota: use com cuidado. Com os organismos que não cumprem o requisito de tamanho pode ocorrer subinoculação,
que pode causar resultados incorretos do teste de suscetibilidade e identificação. Além disso, as contagens de colônias
de estafilococos podem ser elevadas com o método Prompt e podem ser superiores ao intervalo previsto pelo CLSI.
As contagens de colônias elevadas podem afetar adversamente os resultados dos antibióticos que são afetados pelo
inóculo. Consulte a seção Limitações para obter informações sobre os antimicrobianos que se sabe serem dependentes
do inóculo.
Reidratação/inoculação do painel
A reidratação e inoculação é realizada utilizando-se o sistema RENOK com Inoculators-D (B1013-4). Consulte o RENOK
Operator's Manual (Manual do operador do RENOK) para informar-se sobre o uso. Se for utilizado um sistema alternativo,
reidrate com 115 μL ± 10 μL de água de inóculo (PLURONIC). Deve ser atingida uma concentração final do poço de 3–7 x 10
UFC/mL. Para garantir a viabilidade e a pureza do organismo testado, deve ser preparada uma placa de verificação de pureza
estriando o inóculo em uma placa de ágar adequada e realizando a incubação sob as condições adequadas. Se dois ou mais
tipos de colônia estiverem presentes na placa de pureza, isole novamente as colônias e realize o teste novamente.
Sobreposições bioquímicas
1. Utilizando um frasco conta-gotas, cubra os poços ARG e URE com, pelo menos, 3 gotas de óleo mineral. (Esses poços
estão sublinhados no painel.)
C29870–AD
UFC/mL para as concentrações de teste final.
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O usuário deve prestar
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