Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 106

Θολοσίμετρο
Περιδίνηση
Χαρτί ετικετών γραμμωτού κώδικα (B1018-129)
Καπάκια δίσκων WalkAway (B1018-18)
ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ
Παρασκευή των πλακών
1. Απομακρύνετε τις πλάκες που προορίζονται για χρήση από τον χώρο φύλαξης. Μη χρησιμοποιείτε το προϊόν εάν η
συσκευασία έχει αλλοιωθεί (έχει αποσφραγιστεί, τρυπηθεί ή σκιστεί).
2. Κόψτε τη συσκευασία για να την ανοίξετε και αφαιρέστε την πλάκα. Εάν φυλάσσεται στο ψυγείο, αφαιρέστε αμέσως την
πλάκα από τη συσκευασία από αλουμινόφυλλο.
3. Οι πλάκες δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται εάν συντρέχει οποιαδήποτε από τις ακόλουθες καταστάσεις:
A. Δεν υπάρχει αποξηραντικός παράγοντας ή έχει καταστραφεί.
B. Τα βοθρία της πλάκας έχουν αποχρωµατιστεί (π.χ. PHO, διάφοροι αντιμικροβιακοί παράγοντες).
4. Αφήστε τις πλάκες να εγκλιματιστούν σε θερμοκρασία δωματίου πριν από την επανενυδάτωση. Οι πλάκες μπορούν να
στοιβαχτούν εάν τοποθετηθεί επάνω τους μια καθαρή καλυπτρίδα. Όλες οι πλάκες που έχουν ανοιχτεί θα πρέπει να
χρησιμοποιούνται εντός της ίδιας ημέρας ή να απορρίπτονται.
Παρασκευή του ενοφθαλμίσματος
Το Ινστιτούτο κλινικών και εργαστηριακών προτύπων (CLSI) συνιστά τον περιοδικό έλεγχο των πυκνοτήτων των
ενοφθαλμισμάτων σας με εκτέλεση καταμέτρησης αποικιών. Ανατρέξτε στο έγγραφο M07-A10 του CLSI για τις συστάσεις
όσον αφορά την καταμέτρηση των αποικιών. Τα αναμενόμενα αποτελέσματα για το στέλεχος E. coli ATCC 25922 θα
πρέπει να προσεγγίζουν τις 5 x 10
πολύ προσεκτικός κατά την παρασκευή του ενοφθαλμίσματος, ειδικά με μη αυτόματες μεθόδους, οι οποίες εξαρτώνται από
την τεχνική, όπως στην περίπτωση του συστήματος Prompt ή του ενοφθαλμίσματος που παρασκευάζεται χωρίς τη χρήση
φωτομετρικής συσκευής.
Σημείωση: Οι τεχνικές λογαριθμικής φάσης και φάσης στασιμότητας δεν υποστηρίζονται με τα προϊόντα MicroScan.
1. Τεχνική προτύπου θολερότητας - Μέθοδος πρωτογενούς ενοφθαλμίσματος
Η τεχνική προτύπου θολερότητας συνιστάται για τον άμεσο ενοφθαλµισµό όλων των αερόβιων Gram-θετικών κόκκων ή
για την ανίχνευση των ανθεκτικών σε μεθικιλλίνη σταφυλόκοκκων.
A. Με χρήση ενός στείρου κρικοφόρου ή βαμβακοφόρου στειλεού, αγγίξτε την επιφάνεια 4–5 μεγάλων ή 5–10 μικρών,
μορφολογικά παρόμοιων, καλά απομονωμένων αποικιών από ένα τρυβλίο με μη ανασταλτικό άγαρ 18–24 ωρών.
B. Εναιωρήστε σε 3 mL ύδατος ενοφθαλµισµού (απιονισμένο νερό, αποστειρωμένο σε αυτόκαυστο).
C. Πωματίστε ερμητικά και ανακινήστε το εναιώρημα σε αναδευτήρα τύπου vortex για 2–3 δευτερόλεπτα. Η τελική
θολερότητα πρέπει να είναι ισοδύναμη με πρότυπο θολερότητας 0,5 της κλίμακας McFarland. Μια ισοδύναμη
θολερότητα μπορεί να επιτευχθεί χρησιμοποιώντας ένα θολοσίμετρο MicroScan, με εύρος τιμών 0,08 ± 0,02.
D. Εισαγάγετε με πιπέτα 0,1 mL (100 µL) του τυποποιημένου εναιωρήματος σε 25 mL ύδατος ενοφθαλµισμού με
PLURONIC. Πωματίστε ερμητικά. Αναστρέψτε 8–10 φορές για να αναμίξετε το περιεχόμενο.
2. Σύστημα Prompt
Το σύστημα Prompt μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τους πιο ταχέως αναπτυσσόμενους Gram-θετικούς κόκκους.
Ανατρέξτε στο Prompt Inoculation procedural manual (Εγχειρίδιο της διαδικασίας ενοφθαλµισµού του συστήματος
Prompt) για τη σωστή χρήση του.
Σημείωση: Χρησιμοποιείτε με προσοχή. Με τους οργανισμούς που δεν πληρούν τις απαιτήσεις μεγέθους, ενδέχεται
να προκύψει ενοφθαλµισµός μικρότερης ποσότητας από την απαιτούμενη, κάτι που θα μπορούσε να προκαλέσει
εσφαλμένα αποτελέσματα εξέτασης ευαισθησίας και ταυτοποίησης.
σταφυλόκοκκων ενδέχεται να είναι αυξημένοι με τη μέθοδο Prompt, καθώς και να είναι μεγαλύτεροι από το αναμενόμενο
εύρος τιμών του CLSI. Οι αυξημένοι αριθμοί αποικιών ενδέχεται να επηρεάσουν δυσμενώς τα αποτελέσματα
αντιβιοτικών που επηρεάζονται από το ενοφθάλμισμα. Ανατρέξτε στην ενότητα «Περιορισμοί» για τους αντιμικροβιακούς
παράγοντες που είναι γνωστό ότι εξαρτώνται από το ενοφθάλμισμα.
Επανενυδάτωση/ενοφθαλμισμός των πλακών
Η επανενυδάτωση και ο ενοφθαλμισμός εκτελούνται με χρήση του συστήματος RENOK με Inoculators-D (B1013-4). Για
τη χρήση, ανατρέξτε στο RENOK Operator's Manual (Εγχειρίδιο χειρισμού του συστήματος RENOK). Εάν χρησιμοποιείτε
κάποιο εναλλακτικό σύστημα, επανενυδατώστε με 115 ± 10 µL ύδατος ενοφθαλµισμού (PLURONIC). Στα βοθρία θα πρέπει
να επιτυγχάνεται τελική συγκέντρωση 3–7 x 10
οργανισμού που εξετάζεται, θα πρέπει να παρασκευάσετε ένα τρυβλίο καθαρότητας επιστρώνοντας το ενοφθάλµισµα σε
C29870–AD
CFU/mL για τις τελικές συγκεντρώσεις της εξέτασης.
5
CFU/mL. Για να διασφαλίσετε τη βιωσιμότητα και την καθαρότητα του
5
106 of 339
Ο χρήστης θα πρέπει να είναι
1
Επιπλέον, οι αριθμοί των αποικιών των