Beckman Coulter MicroScan B1016-138 Manuel D'utilisation page 281

2. Os meios de cultura nos poços precisam ser totalmente cobertos com óleo mineral, porém o óleo não deve transbordar
para fora dos poços.
NOTA: os instrumentos WalkAway SI e WalkAway plus (e instrumentos WalkAway aprimorados com o recurso de
sobreposição automática de óleo) adicionam o óleo automaticamente aos poços adequados.
Incubação
1. Os painéis podem ser incubados em um sistema WalkAway ou sem o uso dele seguindo as seguintes etapas:
A. Para garantir uma distribuição térmica uniforme durante a incubação, empilhe os painéis em grupos de 3–5.
B. Coloque uma bandeja de proteção limpa em cima de cada grupo de painéis para evitar a evaporação. As bandejas
de proteção podem ser reutilizadas. Não descontamine as bandejas de proteção com álcool. Elas podem ser
higienizadas com água e sabão. Enxágue bem e deixe secar ao ar livre.
C. Incube os painéis por 16–20 horas a 35°C em uma incubadora sem CO
Leitura dos painéis
Os painéis podem ser lidos manualmente utilizando-se o Visualizador de microdiluição MicroScan e os resultados registrados
ou a instrumentação MicroScan (sistemas autoSCAN-4 e WalkAway). Consulte o LabPro Operator's Guide (Manual do
operador do LabPro) para obter informações sobre a leitura de painéis com instrumentação MicroScan.
1. Após uma incubação de 16–20 horas, retire os painéis da incubadora.
2. Limpe o fundo do painel com um tecido sem fiapos para remover qualquer condensação ou resíduos que possam estar
presentes.
3. Leia os painéis apenas se o poço de controle estiver transparente e o poço de controle de crescimento estiver turvo.
Não realize a leitura dos antimicrobianos se o poço de controle estiver turvo ou se não houver crescimento no poço
de crescimento. O crescimento nos poços aparece como turbidez, que pode assumir a forma de uma névoa branca
em todo o poço, uma mancha circular branca no centro do poço ou um crescimento granular fino em todo o poço. O
crescimento inadequado é definido como uma ligeira brancura no poço ou uma transparência do caldo.
4. Se os resultados forem lidos manualmente, registre-os na planilha adequada.
5. Leitura das sensibilidades antimicrobianas (CIM)
A. Realize a leitura de todos os antimicrobianos e o CV, MS, NOV, OPT, NACL e BAC contra um fundo preto (com
iluminação indireta).
B. Execute os testes de β-lactamase para estafilococos com uma CIM de penicilina ≤0,12 μg/mL.
C. Registre os resultados da CIM como a seguir:
a. Após 16–20 horas de incubação, registre a CIM como a concentração antimicrobiana mais baixa
demonstrando inibição de crescimento.
b. Quando ocorrer crescimento em todas as concentrações de um antimicrobiano, a CIM deverá ser registrada
como maior que (>) a concentração mais alta.
c. Quando não houver crescimento em nenhuma concentração de agentes antimicrobianos, a CIM será
registrada como menor ou igual (≤) à concentração mais baixa.
d. Um poço transparente em uma série de poços de crescimento, por exemplo, crescimento a 1, 2 e 8 μg/mL;
mas não a 4 μg/mL, é chamado de poço turvo falso (skipped well), devendo ser ignorado.
e. O crescimento localizado em poços isolados indica contaminação. O teste deverá ser repetido.
f. Para estafilococos com oxacilina, qualquer crescimento deve ser considerado significativo.
D. Uma detecção exata de resistência requer tempos de incubação prolongados para o seguinte:
Incubação
24 horas
24–48 horas
1. A incubação de 24 horas não é necessária para espécies de Estafilococos em painéis contendo o poço da triagem de cefoxitina.
E. O desempenho da vancomicina nos painéis MicroScan foi comparado com os métodos de diluição em microcaldo
recomendados pelo CLSI. Os resultados da vancomicina com estafilococos após 16–20 horas de incubação
(18–20 horas para leituras com o instrumento autoSCAN-4) foram comparáveis aos obtidos em 24 horas com
o método de referência.
C29870–AD
Organismo
Enterococos
Estafilococos
Estreptococos
Enterococos
Antimicrobianos
Triagem de sinergia de
canamicina
Oxacilina 1
Triagem de sinergia de
canamicina
Sinergia de estreptomicina
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