Beckman Coulter MicroScan Manuel D'utilisation page 97

РЕЗУЛЬТАТЫ
Интерпретация результатов для субстратов
Лунка Реагент
HPR
Добавьте 1 каплю пептидазного реагента.
Подождите не менее 30 секунд (но не более
ILE
3 минут) до развития цветной реакции.
PRO
TYR
GLY
GGLY
GLAR
GLPR
AARG
LYAL
ALA
STY
HIS
SUC1
SUC2
TRE
AGL1 Сравните с контрольной лункой NPC.
BGL
BGAL
URE
IDX
AGL2 Добавьте 1 каплю 0,05 N раствора NaOH.
Подождите по крайней мере 5 секунд (но не более
BDF
5 минут), после чего зарегистрируйте результат.
AGAL
Сравните с контрольной лункой NPC.
NAG
CELL
NGAL
1. Положительная окраска может присутствовать не во всей лунке.
2. С некоторыми дрожжами может появляться розовый цвет. Это следует считать положительной реакцией.
ПРИНЦИПЫ РЕАКЦИЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ
β-нафтиламиды аминокислот в качестве субстратов (HPR, ILE, PRO, TYR, GLY, GGLY, GLAR, GLPR, AARG, LYAL,
ALA, STY, HIS) — при гидролизе субстрата в присутствии соответствующего фермента (как правило, ариламидазы
аминокислот) высвобождается β-нафтиламид. β-нафтиламид выявляется при добавлении п-диметиламинокоричного
альдегида (к пептидазному реагенту), который образует комплекс с цветом от розового до фиолетового.
ПРИМЕЧАНИЕ. Ферментом, расщепляющим b-нафтиламид аминокислоты, является аминокислотная ариламидаза.
В качестве синонима ариламидазы часто используют термин «аминопептидаза», однако фактически этот термин
относится к ферменту с другой специфичностью (аминопептидаза отщепляет от пептида N-концевую аминокислоту).
Ариламидаза и аминопептидаза могут гидролизовать один и тот же субстрат — β-нафтиламид аминокислоты. Таким
образом, при использовании панели не всегда возможно установление различных и индивидуальных ферментов.
Одна и та же ариламидаза может гидролизовать β-нафтиламиды нескольких аминокислот.
Углеводы (SUC1, SUC2, TRE) — утилизация сахарозы и трегалозы приводит к снижению pH, которое вызывает
изменение окраски хлорфенолового красного с фиолетовой на желтую. Эти реакции на углеводы избирательны и
могут не соответствовать стандартным реакциям.
Нитрофенильные субстраты (AGL1, BGL, BGAL, AGL2, BDF, AGAL, NAG, CELL, NGAL) — в присутствии
соответствующего фермента субстрат расщепляется с высвобождением свободного о- или п-нитрофенола. При
щелочном pH эти соединения окрашены в желтый цвет. Если реакция происходит при кислотном pH, после инкубации
C29879–AB
ПоложительныйОтрицательный
Любой оттенок
розового, от
красного до
пурпурного
цвета в
1
растворе
Любой оттенок
коричневого или
желтого
Любой оттенок
2
желтого
От розового до
пурпурного
Любой оттенок
синего
Любой оттенок
2
желтого
97 of 141
От желтого до
оранжевого
Лиловый
Прозрачный
Прозрачный
(бесцветный)
/ от бежевого до
желтого
Прозрачный
Прозрачный