Beckman Coulter MicroScan Manuel D'utilisation page 136

3. Sau khi cấy truyền panel bằng 50 μL môi trường cấy truyền, gõ nhẹ vào từng cạnh của panel để giúp đảm bảo trộn đều
cơ chất.
GHI CHÚ: Nếu đọc panel trên thiết bị WalkAway hoặc autoSCAN-4 thì phải cấy truyền cả giếng LOC.
Ủ
1. Xếp các panel thành từng nhóm 3 đến 5 panel, đậy panel trên cùng bằng khay phủ để tránh bay hơi.
2. Ủ các panel đã cấy truyền trong 4 giờ ở nhiệt độ 35–37°C trong buồng ủ không có CO
Đọc panel
1. Lấy thuố c thử Peptidase ra khỏi tủ lạnh ít nhất 30 phút trước khi đọc panel. Thuố c thử Peptidase có thể kết tủa ở nhiệt
độ 4°C, nhưng sẽ tan ra ở nhiệt độ phòng. Không để thuố c thử Peptidase tiếp xúc với nhiệt độ cao hơn để kết tủa tinh
thể tan nhanh hơn vì nhiệt độ cao sẽ làm thuốc thử biến chất.
2. Đọc các panel bằng ánh sáng phản chiếu từ một nền trắng.
3. Sau khi ủ 4 giờ, hãy thêm thuốc thử Peptidase và Natri hiđroxit (NaOH) vào các giếng phù hợp.
A. Thêm 1 giọt thuốc thử Peptidase vào các giếng BNAC, HPR, ILE, PRO, TYR, GLY, GGLY, GLAR, GLPR, AARG,
LYAL, ALA, STY và HIS. Để màu phát triển trong 30 giây, sau đó ghi lại kết quả. Phải ghi lại kết quả trong vòng 3
phút sau khi thêm thuốc thử. BẤT KỲ sắc hồng hoặc đỏ nào xuất hiện trong dung dịch của toàn bộ giếng hoặc bất
kỳ phần nào của giếng phải được diễn giải là dương tính. Phải so sánh các màu với giếng BNAC. Một số giếng
có thể bắt màu cam đậm hơn giếng BNAC. Phải ghi kết quả của những giếng này là âm tính. Các phản ứng chỉ
dương tính khi có màu hồng hoặc đỏ trong dung dịch. Màu trong các giếng này sẽ đậm dần lên. Màu vàng âm
tính có thể trở thành màu cam đậm hơn. Phải diễn giải kết quả này là phản ứng âm tính.
GHI CHÚ: Sau khi thêm Peptidase vào giếng BNAC, giếng này phải chuyển sang màu vàng. Nếu có sắc hồng
hoặc đỏ, phải thải bỏ thuố c thử Peptidase.
B. Thêm 1 giọt NaOH 0,05N vào các giếng AGL2, BDF, AGAL, NPC, NAG, CELL và NGAL. Đọc kết quả sau ít nhất
5 giây nhưng không được quá 5 phút. Mọi sắc vàng phải được ghi là dương tính. So sánh các giếng chứa cơ
chất với giếng NPC.
GHI CHÚ: Các giếng này có thể đậm hơn giếng NPC. Phải diễn giải kết quả này là âm tính nhưng phải xuất hiện
cả màu vàng mới được kết luận là dương tính.
4. Hai giếng kiểm chuẩn được cung cấp để hỗ trợ việc diễn giải phản ứng.
A. BNAC = chất kiểm chuẩn β-naphthylamide. Sau khi thêm thuố c thử Peptidase, giếng này phải bắt màu vàng.
B. NPC = chất kiểm chuẩn nitrophenyl. Giếng này phải không có màu.
5. Tham khảo phần KẾT QUẢ để hỗ trợ quá trình diễn giải kết quả sinh hóa.
GHI CHÚ: WalkAway đọc các giếng không yêu cầu thuốc thử trước để tránh trường hợp kết quả bị thay đổi do hơi của
thuốc thử có thể đọng dưới nắp đậy khay và không thể xác minh các phản ứng sinh hóa theo cách thủ công.
KẾT QUẢ
Diễn giải cơ chất
Giếng Thuố ́ ́ c thử ̉ ̉
HPR
Thêm 1 giọt thuố c thử Peptidase. Để phản ứng màu
ILE
phát triển trong ít nhất 30 giây, nhưng không quá 3
PRO
phút.
TYR
GLY
GGLY
GLAR
GLPR
AARG
LYAL
ALA
STY
HIS
SUC1
SUC2
TRE
AGL1
So sánh với giếng kiểm chuẩn NPC.
BGL
BGAL
URE
C29879–AB
Dương tính
Mọi sắc Hồng,
Đỏ đến Đỏ tươi
trong dung dịch 1
Mọi sắc Nâu
hoặc Vàng
2
Mọi sắc vàng
Hồng đến Đỏ
tươi
136 of 141
.
2
Âm tính
Vàng đến cam
Tím
Trong
Trong suốt/Be
đến Vàng