Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Inkubátor (35–37 °C), nem-CO
Minőség-ellenőrzési mikroorganizmusok:
Candida albicans ATCC 66027
Candida kefyr ATCC 66028
Candida tropicalis ATCC 66029
Cryptococcus albidus ATCC 66030
Cryptococcus neoformans ATCC 66031
Candida glabrata ATCC 66032
Cryptococcus uniguttulatus ATCC 66033
ELJÁRÁS
A panelek előkészítése
1. Vegye ki a tárolóból a használandó paneleket.
tönkrement a szárítószer, vagy ha a csomagolásuk sérült (fel van bontva, ki van szúrva vagy elszakadt).
2. Vágja fel a tasakot, és vegye ki belőle a panelt. Azonnal távolítsa el a panelt a védőfóliából. A rehidratálás előtt hagyja
a paneleket szobahőmérsékletűre melegedni. A panelek egymásra helyezhetők; a legfelső panelre tiszta fedőtálcát kell
helyezni.
Inokulum elkészítése
1. Inokulálja a gyors sarjadzógomba-azonosító panelt egy aktívan növekvő mikroorganizmussal. Ehhez felhasználható
egy Sabouraud dextróz agarlemezről származó primer izolátum, ha elegendő növekedés van jelen. Szükség esetén
hozzon létre másodlagos tenyészetet a sarjadzógomba-izolátumból Sabouraud dextróz agarlemezen, és inkubálja,
amíg elegendő mértékű növekedés tapasztalható.
(szobahőmérsékleten) inkubálni.
MEGJEGYZÉS: A 30 °C-on 48 óránál tovább inkubált tenyészeteket csak akkor használja, ha további inkubáció
szükséges a megfelelő mértékű növekedés eléréséhez.
2. Egy steril tampon vagy oltókacs segítségével távolítsa el az agarlemezről a kinőtt telepet, és emulgeálja 3 mL
inokulumfolyadékban (autoklávozott, deionizált víz 13 x 84 mm-es vagy 13 x 100 mm-es mintacsőben). Minden egyes
szuszpenziót össze kell hasonlítani, és minden szuszpenziónak meg kell felelnie a MicroScan sarjadzógomba-turbiditási
szabványnak. A tesztelendő inokulumszuszpenzió és a sarjadzógomba-turbiditási szabvány összehasonlítását egy
megfelelő fényforrás használatával kell elvégezni, egy fekete kontrasztvonalakkal ellátott fehér kártyához hasonlítva a
tesztcsöveket.
MEGJEGYZÉS: Ügyeljen rá, hogy a mikroorganizmussal ne távolítson el agar táptalajt is.
3. Keverje vagy vortexelje homogénre a szuszpenziót. Egyes sarjadzógomba-törzsek sejtjei nem könnyen oszlanak szét
vizes közegben. Ha a vortexelés nem eredményez homogén szuszpenziót, akkor pihentesse a szuszpenziót 10–15
percig, majd vortexelje újra. Ha a szuszpenzióban még mindig találhatók összetapadt csomók, hagyja őket leülepedni
a mintacső aljára, és a sarjadzógomba-panel beoltásához használja a felülúszót. A felülúszó turbiditásának meg kell
egyeznie a MicroScan sarjadzógomba-turbiditási szabvánnyal. Ha nem egyezik, vigyen be több növekvő telepet az
inokulumfolyadékba, és ismételje meg a fenti eljárást.
MEGJEGYZÉS: NE pipettázzon sejtcsomókat a sarjadzógomba-panel celláiba.
Panelinokuláció
1. Címkézze fel a panelt, és tüntesse fel rajta a minta számát.
2. Adjon hozzá 50 μL sarjadzógomba-szuszpenziót minden egyes szubsztrátot tartalmazó cellához, plusz a BNAC és NPC
kontrollcellákhoz. Az inokulációhoz nem ajánlott a Pasteur-pipetta használata.
1-1. táblázat, Szubsztrátok
Szubsztrátok
Hidroxiprolin-β-naftilamid
L-izoleucin-β-naftilamid
L-prolin-β-naftilamid
L-tirozin-β-naftilamid
Glicin-β-naftilamid
Glicil-glicin-β-naftilamid
Glicil-L-arginin-4-metoxi-β-naftilamid
Glicil-L-prolin-4-metoxi-β-naftilamid
L-arginil-L-arginin-β-naftilamid
*
American Type Culture Collection, Manassas, VA USA
C29879–AB
2
*
Röv.
Szubsztrátok
HPR
L-hisztidin-β-naftilamid
ILE
Szacharóz
PRO
Szacharóz
TYR
Trehalóz
GLY
p-nitrofenil-α-D-glükopiranozid
GGLY
p-nitrofenil-α-D-glükopiranozid
GLAR
p-nitrofenil-β-D-glükopiranozid
GLPR
o-nitrofenil-β-D-galaktopiranozid
AARG
p-nitrofenil-β-D-fukopiranozid
Ne használjon olyan paneleket, amelyek mellett nincs vagy
Ajánlott 48 órán át 30 °C-on vagy 48–72 órán át 25 °C-on
69 of 141
Röv.
HIS
SUC1
1
SUC2
TRE
AGL1
1
AGL2
BGL
BGAL
BDF
Publicité
