Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Въртящ миксер
50 μL пипетор с накрайници
Инкубатор (35–37°C), в който не се използва CO
Организми за контрол на качеството:
Candida albicans ATCC 66027
Candida kefyr ATCC 66028
Candida tropicalis ATCC 66029
Cryptococcus albidus ATCC 66030
Cryptococcus neoformans ATCC 66031
Candida glabrata ATCC 66032
Cryptococcus uniguttulatus ATCC 66033
ПРОЦЕДУРА
Приготвяне на панели
1. Извадете панелите, които ще бъдат използвани, от мястото за съхранение.
използват, ако няма десикант или са счупени или ако целостта на опаковката е компрометирана
(незапечатана, пробита или разкъсана).
2. Разрежете плика и извадете панела. Извадете незабавно панела от фолиевия плик. Изчакайте панелите да
достигнат стайна температура преди рехидратиране. Панелите могат да бъдат подредени един върху друг с
поставена върху тях чиста покривна поставка.
Подготвяне на инокулум
1. Инокулирайте панела за бърза идентификация на дрожди с активно развиващ се организъм. Колонии от плаката
с агар Сабуро с декстроза на първичния изолат може да се използват, ако има наличие на достатъчен растеж.
Ако е необходимо, субкултурирайте дрождевия изолат върху плаки с агар Сабуро с декстроза и инкубирайте,
докато не настъпи достатъчен растеж. Препоръчва се инкубация за 48 часа при температура 30°C или за 48 до
72 часа при температура 25°C (стайна температура).
ЗАБЕЛЕЖКА: Култури, инкубирани повече от 48 часа при температура 30°C, трябва да се използват само ако
се изисква допълнително инкубиране, за да се получи адекватен растеж.
2. Като използвате стерилен тампон или инокулационна примка, отстранете растежа от агарната плака и
емулгирайте в 3 mL вода за инокулация (автоклавирана дейонизирана вода в 13 x 84 mm или 13 x 100 mm
епруветка). Всяка суспензия трябва да бъде сравнена и да бъде еквивалентна на стандарт за мътност за
дрожди MicroScan. Сравняването с тестовата инокулумна суспензия и стандарта за мътност за дрожди трябва
да бъде направено чрез подходящ светлинен източник и чрез сравняване на епруветки с бяла карта с контрастни
черни линии.
ЗАБЕЛЕЖКА: Погрижете се да не се отстрани агарна среда с организма.
3. Смесете или използвайте обръщане за суспензията, докато не се хомогенизира. Някои щамове дрожди не се
дисперсират лесно във вода. Ако след обръщане не се получи хомогенна суспензия, оставете суспензията да
постои 10–15 минути и след това обърнете повторно. Ако в суспензията все още има бучки, оставете бучките да
се утаят на дъното на епруветката и използвайте супернатанта, за да инокулирате панела за дрожди. Мътността
на супернатанта трябва да съответства на стандарта за мътност за дрожди MicroScan. Ако не съответства,
прехвърлете още развити организми във вода за инокулация и повторете горната процедура.
ЗАБЕЛЕЖКА: НЕ пипетирайте бучките от клетки в панела за дрожди.
Инокулиране на панел
1. Поставете етикет на панела с номера на образеца.
2. Добавете 50 μL суспензия на дрожди към всяка ямка, съдържаща субстрат, и към контролните ямки BNAC и NPC.
Употребата на пипета на Пастьор за инокулиране не се препоръчва.
Таблица 1-1, Субстрати
Субстрати
Хидроксипролин-β-нафтиламид
L-изолевцин-β-нафтиламид
L-пролин-β-нафтиламид
L-тирозин-β-нафтиламид
Глицин β-нафтиламид
*
American Type Culture Collection, Манасас, Вирджиния, САЩ
C29879–AB
2
*
Съкр.
Субстрати
HPR
L-хистидин-β-нафтиламид
ILE
Захароза
PRO
Захароза
TYR
Трехалоза
p-нитрофенил-α-D-глюкопиранозид
GLY
102 of 141
Панелите не трябва да се
Съкр.
HIS
SUC1
1
SUC2
TRE
AGL1
Publicité
