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Beckman Coulter MicroScan Manuel D'utilisation page 58

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2. 将接种过的检测板放入无 CO
读 读 读 取 取 取 检 检 检 测 测 测 板 板 板
1. 在读取检测板前,至少提前 30 分钟将肽酶试剂从冰箱中取出。肽酶试剂可能在 4°C 下沉淀,但会在室温下再溶解。
不要试图通过将肽酶试剂暴露于高温下加速晶形沉淀物的再溶解,因为高温会导致试剂降解。
2. 使用来自白色背景的反射光读取检测板。
3. 培养 4 小时后,将肽酶试剂和氢氧化钠 (NaOH) 试剂加入适当的孔中。
A. 将 1 滴 滴 滴 肽酶试剂加入 BNAC、HPR、ILE、PRO、TYR、GLY、GGLY、GLAR、GLPR、AARG、LYAL、ALA、
STY 以及 HIS 孔中。等待 30 秒,出现显色后记录结果。必须在加入试剂后的 3 分钟内记录结果。如果整个孔
或任何一部分孔中的溶液出现任何程度的粉色或红色,则判读为阳性。应将颜色与 BNAC 孔相比较。有些孔可
能会呈现比 BNAC 孔更深的橙色,这些结果应记录为阴性。只有当溶液呈现粉色或红色时,反应才为阳性。这
些孔的颜色将随着时间加深,阴性的黄色可能会成为更深的橙色,此结果应判读为阴性反应。
注 注 注 释 释 释 : : : 将肽酶加入 BNAC 孔后,应呈现黄色。如果出现任何粉色或红色,则不应使用该肽酶试剂。
B. 将 1 滴 滴 滴 0.05 N NaOH 加入 AGL2、BDF、AGAL、NPC、NAG、CELL 以及 NGAL 孔。至少等待 5 秒但不超过 5
分钟,然后记录结果。出现各种程序的黄色时,均应将反应结果记录为阳性。将含底物的孔与 NPC 孔进行比较。
注 注 注 释 释 释 : : : 这些孔的颜色可能比 NPC 孔更深。此结果应判读为阴性,但黄色必须视为阳性。
4. 提供两个对照孔帮助判读反应。
A. BNAC = β-萘酰胺对照。加入肽酶试剂后,这个孔将呈现黄色。
B. NPC = 硝基苯基对照。这个孔应该没有颜色。
5. 请参考"结果"部分,了解对结果的生物化学判读。
注 注 注 释 释 释 : : : WalkAway 首先读取不需要试剂的孔,以防可能积聚在托盘盖下的试剂烟雾造成结果改变。因此,无法手动验
证生化反应。
结 结 结 果 果 果
底 底 底 物 物 物 判 判 判 读 读 读
Well
试 试 试 剂 剂 剂
HPR
加入 1 滴肽酶试剂。至少等待 30 秒但不超过 3 分
ILE
钟,让颜色反应显色。
PRO
TYR
GLY
GGLY
GLAR
GLPR
AARG
LYAL
ALA
STY
HIS
SUC1
SUC2
TRE
AGL1
与 NPC 对照孔比较。
BGL
BGAL
URE
IDX
AGL2
加入 1 滴 0.05 N NaOH。至少等待 5 秒但不超过 5 分
BDF
钟,然后记录结果。与 NPC 对照孔比较。
AGAL
NAG
CELL
NGAL
1. 阳性颜色可能不会漫布整个孔。
2. 有些酵母菌可能会呈现粉色。这应视为阳性反应。
C29879–AB
的孵育盘中,在 35-37°C 下孵育 4 小时。
2
58 of 141
阳 阳 阳 性 性 性
阴 阴 阴 性 性 性
溶液中有任何程
黄色到橙色
度的粉色、红色
1
到品红
任何程度的棕色
紫色
或黄色
任何程度的黄色
2
透明
粉色到品红
清澈/米黄到黄色
任何程度的蓝色 透明
任何程度的黄色
2
透明

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