Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Inkubator (35–37°C), niezawierający CO
Mikroorganizmy kontroli jakości:
Candida albicans ATCC 66027
Candida kefyr ATCC 66028
Candida tropicalis ATCC 66029
Cryptococcus albidus ATCC 66030
Cryptococcus neoformans ATCC 66031
Candida glabrata ATCC 66032
Cryptococcus uniguttulatus ATCC 66033
PROCEDURA
Przygotowanie paneli
1. Wyjąć panele z miejsca przechowywania. Nie należy używać paneli, jeżeli brak jest środka osuszającego lub jest
on uszkodzony, bądź opakowanie jest naruszone (niezaklejone, przebite lub rozdarte).
2. Rozciąć torebkę i wyjąć panel. Natychmiast wyjąć panel z torebki foliowej. Przed powtórnym uwodnieniem panele
powinny osiągnąć temperaturę pokojową. Panele można ustawiać jeden na drugim, umieszczając przezroczystą
pokrywkę na górze każdego z nich.
Przygotowanie inokulum
1. Inokulować panel do szybkiej identyfikacji drożdży z aktywnie rosnącym mikroorganizmem. Kolonie z pierwotnej izolacji
płytki agaru Sabouraud z dekstrozą mogą być stosowane, jeżeli obecny jest wystarczający wzrost. W razie potrzeby
wykonać podhodowlę izolatu drożdży bezpośrednio na płytkę agaru Sabouraud z dekstrozą i inkubować do wystąpienia
wystarczającego wzrostu. Zalecana jest inkubacja przez 48 godzin w temperaturze 30°C lub od 48 do 72 godzin
w temperaturze 25°C (temperatura pokojowa).
UWAGA: hodowle inkubowane przez ponad 48 godzin w temperaturze 30°C należy stosować jedynie wtedy, gdy do
uzyskania odpowiedniego wzrostu wymagana jest dodatkowa inkubacja.
2. Stosując jałową wymazówkę lub ezę do posiewów, usunąć wzrost z płytki agaru i emulsyfikować w 3 mL wody
inokulacyjnej (autoklawowana woda dejonizowana w probówce 13 x 84 mm lub 13 x 100 mm). Każda zawiesina musi
być porównana i równoważna wzorcowi zmętnienia drożdżowego MicroScan. Porównanie zawiesiny inokulacyjnej testu
ze wzorcem zmętnienia drożdżowego należy przeprowadzać przy użyciu odpowiedniego źródła światła i porównując
probówki z próbką z białą kartą zawierającą kontrastujące czarne linie.
UWAGA: należy zachować ostrożność, aby upewnić się, że z mikroorganizmem nie jest usuwane podłoże agarowe.
3. Mieszać lub worteksować zawiesinę, aż będzie jednorodna. Niektóre szczepy drożdży nie ulegają łatwej dyspersji
w wodzie. Jeżeli worteksowanie nie daje jednorodnej zawiesiny, należy umożliwić zawiesinie osiadanie przez 10–15
minut i worteksować ponownie. Jeżeli zawiesina nadal ma zlepienia, należy umożliwić ich opadnięcie na dno probówki
z próbką i użyć supernatantu do inokulacji panelu drożdży. Zmętnienie supernatantu musi odpowiadać wzorcowi
zmętnienia drożdżowego MicroScan. Jeżeli tak nie jest, należy przenieść więcej wzrostu do wody inokulacyjnej
i powtórzyć powyższą procedurę.
UWAGA: NIE pipetować zlepionych komórek do panelu drożdży.
Inokulacja panelu
1. Opisać panel numerem próbki.
2. Dodać 50 μL zawiesiny drożdży do każdej studzienki zawierającej substrat oraz studzienek kontrolnych BNAC i NPC.
Nie jest zalecane stosowanie do inokulacji pipety Pasteura.
Tabela 1-1, Substraty
Substraty
Hydroksyprolino-β-naftyloamid
L-izoleucyno-β-naftyloamid
L-prolino-β-naftyloamid
L-tyrozyno-β-naftyloamid
Glicyno-β-naftyloamid
Glicyloglicyno-β-naftyloamid
Glicylo-L-arginino-4-metoksy-β-naftyloamid
Glicylo-L-prolino-4-metoksy-β-naftyloamid
L-arginylo-L-arginino-β-naftyloamid
L-lizylo-L-alanino-4-metoksy-β-naftyloamid
*
American Type Culture Collection, Manassas, VA USA
C29879–AB
2
*
Skrót
Substraty
HPR
L-histydyno-β-naftyloamid
ILE
Sukroza
PRO
Sukroza
TYR
Trehaloza
GLY
p-nitrofenylo-α-D-glukopiranozyd
GGLY
p-nitrofenylo-α-D-glukopiranozyd
GLAR
p-nitrofenylo-β-D-glukopiranozyd
GLPR
o-nitrofenylo-β-D-galaktopiranozyd
AARG
p-nitrofenylo-β-D-fukopiranozyd
LYAL
p-nitrofenylo-α-D-galaktopiranozyd
76 of 141
Skrót
HIS
SUC1
1
SUC2
TRE
AGL1
1
AGL2
BGL
BGAL
BDF
AGAL
Publicité
