Beckman Coulter MicroScan Manuel D'utilisation page 39

RESULTADOS
Interpretações de substrato
Well Reagente
HPR Adicione uma gota de reagente peptidase. Permita
o desenvolvimento de reação de cor durante, pelo
ILE
menos, 30 segundos, mas não mais do que 3 minutos.
PRO
TYR
GLY
GGLY
GLAR
GLPR
AARG
LYAL
ALA
STY
HIS
SUC1
SUC2
TRE
AGL1 Compare com poço de controlo NPC.
BGL
BGAL
URE
IDX
AGL2 Adicione uma gota de 0,05 N de NaOH. Aguarde pelo
menos 5 segundos, mas não mais do que 5 minutos,
BDF
antes de registar o resultado. Compare com poço de
AGAL
controlo NPC.
NAG
CELL
NGAL
1. Uma cor positiva pode não estar presente ao longo de todo o poço.
2. Em algumas leveduras, poderá estar presente uma cor rosa. Tal deve ser considerado uma reação positiva.
PRINCÍPIOS DAS REAÇÕES DE IDENTIFICAÇÃO
Substratos de aminoácidos β-naftilamida (HPR, ILE, PRO, TYR, GLY, GGLY, GLAR, GLPR, AARG, LYAL, ALA, STY,
HIS) — Quando o substrato é hidrolisado pela enzima apropriada (normalmente um aminoácido arilamidase), é libertada
β-naftilamina. A β-naftilamina é detetada através da adição de p-dimetilaminobenzaldeído (no reagente peptidase), que cria
um complexo de cor rosa arroxeada.
NOTA: A enzima responsável pela clivagem do aminoácido β-naftilamida é um aminoácido arilamidase.
«aminopeptidase» é frequentemente utilizado como um sinónimo de arilamidase, mas, na verdade, representa uma enzima
com uma especificidade diferente (uma aminopeptidase efetua a clivagem do aminoácido N-terminal de um peptídeo). Uma
arilamidase e uma aminopeptidase podem hidrolisar o mesmo substrato de aminoácido β-naftilamida. Assim, o painel não
mede necessariamente enzimas únicas e diferentes. Uma única arilamidase poderá hidrolisar várias β-naftilamidas de
aminoácidos.
Hidratos de carbono (SUC1, SUC2, TRE) — A utilização de sucrose e de trealose origina uma descida de pH que causa a
alteração do vermelho de clorofenol de roxo para amarelo. Estas reações de hidratos de carbono são seletivas e podem não
estar em conformidade com reações convencionais.
Substratos de nitrofenilo (AGL1, BGL, BGAL, AGL2, BDF, AGAL, NAG, CELL, NGAL) — Se a enzima apropriada estiver
presente, o substrato é clivado, libertando orto-nitrofenol ou para-nitrofenol. Com um pH alcalino, estes compostos são
amarelos. Se a reação ocorrer com um pH ácido, o NaOH deve ser adicionado após a incubação, antes que os resultados
possam ser lidos. Antes da adição de hidróxido de sódio, os poços podem apresentar-se incolores ou amarelos-pálidos.
Fosfatase de indoxil (IDX) — O fosfato de indoxil é clivado por uma fosfatase, libertando indoxil. O indoxil combina-se com
o oxigénio para formar anil, um precipitado insolúvel azul ou azul acinzentado.
Ureia (URE) — A ureia é dividida pela urease para formar amónia e dióxido de carbono. A amónia (na forma de carbonato
de amónia) provoca um aumento do pH, o qual é detetado pela alteração do vermelho de fenol de amarelo para vermelho.
IDENTIFICAÇÃO DO ORGANISMO
O Livro de códigos de biótipos de levedura MicroScan é utilizado para a identificação de organismos de teste desconhecidos.
Este Livro de códigos foi criado a partir da base de dados da MicroScan relativa aos testes incluídos no painel de identificação.
C29879–AB
Positivo
Qualquer
tonalidade de
rosa, vermelho
a magenta na
solução 1
Qualquer
tonalidade de
castanho ou
amarelo
Qualquer
tonalidade de
2
amarelo
Rosa a magenta Transparente/bege
Qualquer
tonalidade de
azul
Qualquer
tonalidade de
2
amarelo
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Negativo
Amarelo a laranja
Púrpura
Claro
a amarelo
Claro
Claro
O termo