Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
OBSERVAȚIE: dacă panelul trebuie citit pe un sistem WalkAway sau autoSCAN-4, trebuie inoculat și godeul LOC.
Incubarea
1. Stivuiți panelurile în grupuri de la 3 până la 5 cu o tavă de acoperire peste panelul din partea de sus pentru a preveni
evaporarea.
2. Incubați panelurile inoculate timp de 4 ore la 35°C–37°C într-un incubator fără CO
Citirea panelurilor
1. Scoateți reactivul Peptidază din frigider cu cel puțin 30 de minute înainte de a citi panelurile. Reactivul Peptidază poate precipita
la 4°C, dar se va redizolva la temperatura camerei. Nu expuneți reactivul Peptidază la temperaturi ridicate pentru a accelera
redizolvarea precipitatului cristalin, deoarece temperaturile ridicate vor determina degradarea reactivului.
2. Citiți panelurile utilizând lumina reflectată de un fundal alb.
3. După 4 ore de incubare, adăugați reactivii Peptidază și Hidroxid de sodiu (NaOH) în godeurile corespunzătoare.
A.
Adăugați 1 picătură de reactiv Peptidază la godeurile BNAC, HPR, ILE, PRO, TYR, GLY, GGLY, GLAR, GLPR, AARG, LYAL,
ALA, STY și HIS. Lăsați culoarea să se dezvolte timp de 30 de secunde înainte de înregistrarea rezultatelor. Rezultatele
trebuie înregistrate în interval de 3 minute de la adăugarea reactivului. Prezența ORICĂREI nuanțe de roz sau de roșu
în soluție în întregul godeu sau în oricare porțiune a godeului se interpretează ca pozitiv. Culorile trebuie comparate cu
godeul BNAC. Unele godeuri pot apărea ca fiind de nuanță portocalie mai închisă decât godeul BNAC. Acestea trebuie
înregistrate ca negative. Reacțiile sunt pozitive numai dacă în soluție există nuanțe de roz sau roșu. Culoarea din aceste
godeuri se va închide cu timpul. O culoare galbenă negativă poate deveni o culoare portocalie mai închisă. Aceasta
trebuie interpretată ca reacție negativă.
OBSERVAȚIE: după adăugarea de reactiv Peptidază la godeul BNAC, acesta ar trebui să fie galben. Dacă există orice
nuanță de roz sau roșu, reactivul Peptidază nu trebuie utilizat.
B.
Adăugați 1 picătură de NaOH 0,05N la godeurile AGL2, BDF, AGAL, NPC, NAG, CELL și NGAL. Așteptați cel puțin 5 secunde,
dar nu mai mult de 5 minute înainte de înregistrarea rezultatelor. Orice nuanță de galben trebuie înregistrată ca rezultat
pozitiv. Comparați godeurile care conțin substrat cu godeul NPC.
OBSERVAȚIE: aceste godeuri pot părea de culoare mai închisă decât godeul NPC. Acest lucru trebuie interpretat ca
rezultat negativ, însă trebuie să existe o culoare galbenă pentru a fi considerat rezultat pozitiv.
4. Sunt furnizate două godeuri de control pentru asistarea interpretării reacțiilor.
A.
BNAC = control β-naftilamidă. După adăugarea reactivului Peptidază, acest godeu va avea culoarea galbenă.
B.
NPC = control nitrofenil. Acest godeu trebuie să fie incolor.
5. Consultați secțiunea REZULTATE pentru ajutor în interpretarea biochimică.
OBSERVAȚIE: WalkAway citește godeuri care nu necesită mai întâi reactivi pentru a preveni rezultate alterate din cauza
emanațiilor de reactiv care pot fi prinse sub capacul tăvii, deci reacțiile biochimice nu pot fi verificate manual.
REZULTATE
Interpretarea substraturilor
Godeu
Reactiv
HPR
Adăugați 1 picătură de reactiv Peptidază. Permiteți
ILE
dezvoltarea reacției de culoare timp de cel puțin 30 de
PRO
secunde, dar nu mai mult de 3 minute.
TYR
GLY
GGLY
GLAR
GLPR
AARG
LYAL
ALA
STY
HIS
SUC1
SUC2
TRE
AGL1
Comparați cu godeul de control NPC.
BGL
BGAL
URE
IDX
C29879–AB
Pozitivă
Orice nuanță de
roz și de la roșu la
violet în soluție
1
Orice nuanță de
brun sau galben
Orice nuanță de
2
galben
De la roz la violet De la limpede/bej
Orice nuanță de
albastru
110 of 141
.
2
Negativ
Galben spre
portocaliu
Violet
Limpede
la galben
Limpede
Publicité
