Télécharger Imprimer la page

Beckman Coulter MicroScan Manuel D'utilisation page 95

Publicité

Les langues disponibles
  • FR

Les langues disponibles

  • FRANÇAIS, page 8
Пипеттор 50 мкл с наконечниками
Инкубатор для температуры 35–37°C, без CO
Микроорганизмы для контроля качества:
Candida albicans ATCC 66027
Candida kefyr ATCC 66028
Candida tropicalis ATCC 66029
Cryptococcus albidus ATCC 66030
Cryptococcus neoformans ATCC 66031
Candida glabrata ATCC 66032
Cryptococcus uniguttulatus ATCC 66033
МЕТОДИКА
Подготовка панелей
1. Достаньте необходимые панели из места хранения.
повреждения влагопоглотителя или при нарушении целостности упаковки (упаковка вскрыта, проколота
или разорвана).
2. Разрежьте пакет и извлеките панель. Панель сразу же извлеките из фольгового пакета. Перед заполнением
планшеты необходимо выдержать до достижения комнатной температуры. Панели можно складывать в стопку,
накрыв сверху чистым лотком-крышкой.
Приготовление инокулята
1. Инокулируйте панель для быстрой идентификации дрожжей активно растущим микроорганизмом. В случае
достаточного роста могут использоваться колонии из чашки с декстрозным агаром Сабуро для первичной
изоляции. При необходимости проведите пересев изолята дрожжей на чашке с декстрозным агаром Сабуро и
инкубируйте до тех пор, пока рост не станет достаточным. Рекомендуется инкубация в течение 48 часов при
температуре 30°C или в течение 48–72 часов при температуре 25°C (комнатная температура).
ПРИМЕЧАНИЕ. Культуры, инкубированные в течение более чем 48 часов при температуре 30°C, следует
использовать лишь в том случае, если для достижения достаточного роста требуется дополнительная
инкубация.
2. С помощью стерильного тампона или петли для инокуляции отберите выросшие колонии из чашки с агаром и
суспендируйте их в 3 мл воды для инокулята (автоклавированная деионизованная вода в пробирке 13 x 84 мм или
13 x 100 мм). Каждая суспензия должна сопоставляться с дрожжевым стандартом мутности MicroScan и иметь
эквивалентную мутность. Сопоставление исследуемой суспензии инокулята с дрожжевым стандартом мутности
следует проводить с использованием соответствующего источника освещения и при сравнении пробирок на фоне
белой карточки с нанесенными контрастными черными линиями.
ПРИМЕЧАНИЕ. Не допускайте захвата среды агара при отборе микроорганизма.
3. Перемешайте суспензию вручную или на мешалке до однородности.
суспендируются в воде. Если перемешивание на мешалке не приводит к получению однородной суспензии,
дайте суспензии постоять в течение 10–15 минут, а затем повторите перемешивание. Если и после этого
в суспензии присутствуют сгустки, подождите, пока сгустки осядут на дно пробирки, а затем используйте
надосадочную жидкость для инокуляции «дрожжевой» панели.
совпадать с мутностью дрожжевого стандарта MicroScan. Если мутность не совпадает, перенесите из чашки в
воду для инокулята большее количество микроорганизмов и повторите процедуру, описанную выше.
ПРИМЕЧАНИЕ. НЕ допускается переносить пипеткой сгустки клеток в «дрожжевую» панель.
Инокуляция панели
1. Прикрепите к панели этикетку с номером образца.
2. В каждую лунку с субстратом и в две контрольные лунки (BNAC и NPC) добавьте по 50 мкл дрожжевой суспензии.
Пастеровскую пипетку для инокуляции использовать не рекомендуется.
Таблица 1-1. Субстраты
Субстраты
Гидроксипролин-β-нафтиламид
L-изолейцин-β-нафтиламид
L-пролин-β-нафтиламид
L-тирозин-β-нафтиламид
*
American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA
C29879–AB
2
*
Сокр.
Субстраты
HPR
L-гистидин-β-нафтиламид
ILE
Сахароза
PRO
Сахароза
TYR
Трегалоза
Не используйте панели в случае отсутствия или
Мутность надосадочной жидкости должна
95 of 141
Некоторые штаммы дрожжей плохо
Сокр.
HIS
SUC1
1
SUC2
TRE

Publicité

loading