Beckman Coulter MicroScan Manuel D'utilisation page 123

RESULTADOS
Interpretações de substrato
Poço Reagente
HPR Adicione 1 gota de reagente peptidase. Deixe a
reação de coloração se desenvolver por, no mínimo,
ILE
30 segundos, mas não mais do que 3 minutos.
PRO
TYR
GLY
GGLY
GLAR
GLPR
AARG
LYAL
ALA
STY
HIS
SUC1
SUC2
TRE
AGL1 Compare com o poço de controle NPC.
BGL
BGAL
URE
IDX
AGL2 Adicione 1 gota de NaOH 0,05 N. Aguarde pelo
menos 5 segundos, mas não mais do que 5 minutos,
BDF
para registrar o resultado. Compare com o poço de
AGAL
controle NPC.
NAG
CELL
NGAL
1. Uma coloração positiva pode não estar presente em todo o poço.
2. Uma coloração rosa pode estar presente com algumas leveduras. Isso deve ser considerado uma reação positiva.
PRINCÍPIOS DAS REAÇÕES DE IDENTIFICAÇÃO
Substratos de aminoácido β-naftilamida (HPR, ILE, PRO, TYR, GLY, GGLY, GLAR, GLPR, AARG, LYAL, ALA, STY,
HIS) — Quando o substrato é hidrolisado pela enzima adequada (geralmente um aminoácido arilamidase), a β-naftilamina
é liberada. A β-naftilamida é detectada pela adição de p-dimetilaminocinamaldeído (no reagente peptidase) que cria um
complexo com coloração de rosa a roxa.
NOTA: a enzima que cliva um aminoácido β-naftilamida é um aminoácido arilamidase. O termo "aminopeptidase" é utilizado
com frequência como sinônimo para arilamidase, mas representa, na verdade, uma enzima com especificidade diferente (um
aminopeptidase cliva o aminoácido N-terminal de um peptídeo). Um arilamidase e um aminopeptidase podem hidrolisar o
mesmo substrato aminoácido β-naftilamida. Por essa razão, o painel não está necessariamente medindo enzimas diferentes
e únicas. Um único arilamidase pode hidrolisar diversos aminoácidos β-naftilamidas.
Carboidratos (SUC1, SUC2, TRE) — A utilização de sacarose e trealose resulta em uma queda de pH que faz com que o
clorofenol vermelho mude de roxo para amarelo. Essas reações de carboidratos são seletivas e podem não corresponder às
reações convencionais.
Substratos de nitrofenil (AGL1, BGL, BGAL, AGL2, BDF, AGAL, NAG, CELL, NGAL) — Se a enzima apropriada estiver
presente, o substrato é clivado liberando orto- ou para-nitrofenol. Em pH alcalino, esses componentes são amarelos. Se a
reação ocorrer em um pH ácido, NaOH deve ser adicionado após a incubação, antes de realizar a leitura dos resultados. Os
poços podem ser incolores ou amarelos-claros antes da adição do hidróxido de sódio.
Indoxil fosfatase (IDX) — Indoxil fosfato é clivado por uma fosfatase para liberar indoxil. O indoxil se combina com oxigênio
para formar o azul índigo, que é um precipitado azul ou azul acinzentado insolúvel.
Ureia (URE) — Ureia é dividida por urease para formar amônia e dióxido de carbono. A amônia (na forma de carbonato de
amônio) causa uma elevação no pH que é detectada pelo fenol vermelho mudando de amarelo para vermelho.
IDENTIFICAÇÃO DE ORGANISMOS
O Código de biótipos para identificação rápida de leveduras MicroScan é usado para a identificação de organismos de
teste desconhecidos. Esse código foi gerado a partir do banco de dados MicroScan para os testes incluídos no painel
de identificação. O Código de leveduras se baseia em uma análise de computador dos 27 testes do Painel de identificação
C29879–AB
Positivo
Qualquer
tonalidade de
rosa e vermelho
a magenta na
solução 1
Qualquer
tonalidade de
marrom ou
amarelo
Qualquer
tonalidade de
2
amarelo
Rosa para
magenta
Qualquer
tonalidade de
azul
Qualquer
tonalidade de
2
amarelo
123 of 141
Negativo
Amarelo a laranja
Roxo
Transparente
Incolor/bege para
amarelo
Transparente
Transparente