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ADVERTENCIA: Si decidiera usar una Solución Amortiguadora Neutralizante (NB) que contenga el complejo aril
sulfonato como solución hidratante para la esponja, deberá preparar una dilución 1:2 (1 parte de muestra en 1 parte de
caldo de enriquecimiento estéril) de la muestra ambiental enriquecida antes de realizar la prueba para reducir los riesgos
asociados con un resultado falso negativo que provoque la diseminación del producto contaminado.
Se recomienda que el tamaño del área de muestreo para verificar la presencia o ausencia de patógenos en la superficie sea
de no menos de 100 cm
(10 cm x 10 cm o 4" x 4"). Al hacer el muestreo con una esponja, cubra toda el área moviéndose
2
en dos direcciones (de izquierda a derecha y luego desde arriba hacia abajo) o recolecte muestras ambientales según su
protocolo de muestreo actual o de acuerdo con los lineamientos del Manual de Bacteriología Analítica (BAM) de la FDA
de la guía de Laboratorio de Microbiología (MLG) de la agencia de Servicio de Seguridad e Inspección de los Alimentos
(FSIS) del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA)
1. Permita que el medio de enriquecimiento de Caldo Demi-Fraser (que incluye citrato de amonio férrico) se equilibre a la
temperatura ambiente del laboratorio.
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica según las Tablas 2, 3 o 4.
3. Homogeneice totalmente mediante mezclado, un homogeneizador peristáltico, agitación excéntrica o a mano durante
2 ± 0,2 minutos. Incube a 37 ± 1 °C durante 24 a 30 horas según las Tablas 2, 3 o 4.
Tabla 2: Protocolos generales de enriquecimiento mediante enriquecimiento con Caldo Demi-Fraser a 37 ±1 °C Caldo
Fraser según sea necesario.
Tamaño
Matriz de la
de la
muestra
muestra
Carnes, aves,
mariscos y
pescados
procesadas
con calor,
cocidos,
curados
Productos
lácteos
25 g
procesados
con calor/
pasteurizados
Productos
agrícolas y
vegetales
Alimentos
con múltiples
componentes
1 esponja
Muestras
ambientales
1 hisopo
Carnes, aves,
mariscos y
25 g
pescados
crudos
Matriz de la
muestra
Tamaño
de la
muestra
Productos
lácteos
25 g
crudos
Volumen del
Temperatura
Caldo de
de enriqueci-
enriqueci-
miento
miento (ml)
(±1 °C)
225
37
100 o 225
37
10
37
475
37
Enriquecimiento primario
(Caldo Demi-Fraser)
(a)
Volumen del
Temperatura
Caldo de
de enriqueci-
enriqueci-
miento
miento (ml)
(±1 °C)
225
37
o de la norma ISO 18593
(2)
Tiempo de
enriqueci-
miento (h)
24 a 30
24 a 30
24 a 30
28 a 32
Enriquecimiento secundario
(Caldo Fraser)
Tiempo de
Tamaño
Temperatura
enriqueci-
de la
de enriqueci-
miento (h)
muestra
miento (±1 °C)
Transfiera
0,1 ml a
20 a 24
10 ml de
Caldo
Fraser
5
ES
(Español)
.
(7)
(a)
Volumen de
análisis de la
Tiempo de
muestra
enriqueci-
miento (h)
37
20 a 24
,
(1)
(b)
10 μl
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