3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 133

7. Analise e confirme a execução configurada no 3M Software do Sistema de Detecção Molecular.
8. Clique no botão iniciar do software e selecione o instrumento a utilizar. A tampa do instrumento selecionado abre
automaticamente.
9. Posicione a 3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular no 3M Equipamento de Detecção Molecular e
feche a tampa para iniciar o ensaio. Os resultados são fornecidos em 75 minutos, embora os positivos possam ser
detectados mais cedo.
10. Depois que o ensaio estiver concluído, remova a 3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular do 3M
Equipamento de Detecção Molecular e descarte os tubos mergulhando-os em uma solução de 1-5% (v: v em água) de
água sanitária por 1 hora, fora da área de preparação do ensaio.
Recomendação: Para minimizar o risco de falso-positivo devido à contaminação, nunca abra tubos reagentes que
contenham DNA amplificado. Isto inclui tubos de Controle de Reagentes, tubos de Reagente e tubos de Controle de
Matriz. Sempre descarte os tubos de reagentes selados mergulhando-os em uma solução de 1-5% (v:v em água) de água
sanitária por 1 hora, fora da área de preparação do ensaio.
Resultados e interpretação
Um algoritmo interpreta a curva de saída de luz que resulta da detecção da amplificação do ácido nucléico. Os resultados
são analisados automaticamente pelo software e são codificados em cores de acordo com o resultado. Um resultado é
determinado positivo ou negativo através da análise de diversos parâmetros exclusivos de curvas. Resultados positivos
presumíveis são reportados em tempo real, enquanto resultados negativos e a inspecionar serão exibidos após a conclusão
da execução.
Amostras positivas presumíveis devem ser confirmadas conforme os procedimentos operacionais padrão de laboratórios,
ou seguindo o método de confirmação de referência apropriado
enriquecimento primário para o caldo de enriquecimento secundário (se aplicável), seguido por plaqueamento e
confirmação posterior de amostras isoladas utilizando métodos bioquímicos e sorológicos apropriados.
No contexto da VALIDAÇÃO NF, todas as amostras identificadas como positivas pelo 3M Ensaio para Detecção Molecular
de Listeria 2 devem ser confirmada por um dos seguintes testes:
Opção 1: Usar o padrão ISO 11290-1
Opção 2: Implementar um método de confirmação consistindo do seguinte: Transferir 0,1 mL de caldo Demi-Fraser.
Coloque diretamente no agar seletivo descrito na ISO 11290-1
Opção 3: Usar sondas de ácido nucleico conforme descrito no padrão EN ISO 7218
agar seletivo (veja a Opção 1 ou 2).
Opção 4: Usar qualquer outro método certificação com VALIDAÇÃO NF, cujo princípio precisa ser diferente do 3M Ensaio
para Detecção Molecular de Listeria 2. Deve-se utilizar o protocolo completo descrito para este segundo método validado.
Todas as etapas anteriores ao início da confirmação devem ser comuns a ambos os métodos.
No caso de resultados discordantes (presumidamente positivo com o método alternativo, não confirmado por um dos
meios descritos acima), o laboratório deve seguir os passos necessários para garantir a validade do resultado obtido.
Obs.: Até mesmo uma amostra negativa não resultará em leitura zero, uma vez que o sistema e os reagentes de
amplificação do 3M Ensaio para Detecção Molecular de Listeria 2 têm uma leitura da unidade de luz relativa (RLU) em
"segundo plano".
Em casos raros de saída de luz incomum, o algoritmo rotula o caso como "Inspecionar". A 3M recomenda que o usuário
repita o ensaio para qualquer amostra a inspecionar. Se o resultado continuar a ser Inspecionar, proceda ao teste de
confirmação utilizando seu método preferencial ou conforme especificado pelos regulamentos locais
Em caso de dúvidas sobre aplicações ou procedimentos específicos, visite nosso site em www.3M.com/foodsafety ou
entre em contato com o seu representante ou distribuidor local da 3M.
começando do enriquecimento Demi-Fraser
(3)
(3)
10
20 µL
, começando com a transferência do caldo de
(1, 2, 3)
.
, realizado em colônias isoladas, no
(5)
PT (Português)