3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 249

5.4 Ulangi langkah 5.1 sesuai keperluan berdasarkan jumlah sampel yang akan diuji.
5.5 Jika semua sampel lisat sudah dipindahkan, ulangi langkah 5.1 untuk memindahkan 20 µL lisat NC ke tabung
Reagen.
5.6 Pindahkan 20 µL lisat NC ke tabung RC. Semprotkan dengan kemiringan tertentu sehingga tidak mengacaukan
pelet. Campurkan dengan 5 kali menyedot dan menyemprotkan perlahan-lahan.
6. Masukkan tabung tertutup ke dalam Baki Pemuat Kecepatan Deteksi Molekuler 3M yang bersih dan telah
didekontaminasi. Tutup dan segel tutup Baki Pemuat Kecepatan Deteksi Molekuler 3M.
7. Periksa dan konfirmasi proses yang telah dikonfigurasi pada Perangkat Lunak Deteksi Molekuler 3M.
8. Klik tombol Start pada perangkat lunak dan pilih instrumen yang akan digunakan. Tutup instrumen yang dipilih akan
membuka secara otomatis.
9. Masukkan Baki Pemuat Kecepatan Deteksi Molekuler 3M ke Instrumen Deteksi Molekuler 3M dan tutup rapat untuk
memulai pengujian. Hasilnya akan ditampilkan setelah 75 menit, meskipun hasil positif dapat terdeteksi lebih cepat.
10. Setelah pengujian selesai, keluarkan Baki Pemuat Kecepatan Deteksi Molekuler 3M dari Instrumen Deteksi Molekuler
3M dan buang tabung dengan merendamnya ke dalam larutan pemutih rumah tangga 1-5% (v:v dalam air) selama 1 jam
dan jauhkan dari area persiapan pengujian.
Perhatian: Untuk meminimalkan risiko positif palsu akibat kontaminasi silang, jangan membuka tabung reagen yang
berisi DNA hasil amplifikasi. Termasuk juga tabung Kontrol Reagen, Reagen, dan Kontrol Matriks. Selalu buang tabung
reagen yang tersegel dengan merendamnya ke dalam larutan pemutih rumah tangga 1-5% (v:v dalam air) selama 1 jam
dan jauhkan dari area persiapan pengujian.
Hasil dan Interpretasi
Algoritma menginterpretasikan kurva keluaran cahaya yang dihasilkan dari deteksi amplifikasi asam nukleat. Hasil
dianalisis secara otomatis oleh perangkat lunak dan diberi kode warna berdasarkan hasil tersebut. Hasil Positif atau Negatif
ditentukan dari analisis sejumlah parameter kurva khusus. Hasil yang dianggap positif dilaporkan dalam waktu nyata,
sedangkan hasil Negatif dan Perlu pemeriksaan akan ditampilkan setelah pengujian selesai.
Sampel yang dianggap positif harus dikonfirmasi sesuai dengan standar prosedur pengoperasian laboratorium atau dengan
mematuhi metode konfirmasi rujukan yang sesuai
pengaya sekunder (jika sesuai), dilanjutkan dengan pengusapan dan konfirmasi isolat menggunakan metode biokimia dan
serologi.
Dalam konteks VALIDASI NF, seluruh sampel yang diidentifikasi positif oleh Deteksi Molekuler 3M untuk Pengujian 2
Listeria harus dibuktikan dengan salah satu dari uji berikut:
Opsi 1: Menggunakan standar ISO 11290-1
Opsi 2: Mengimplementasikan metode konfirmasi yang terdiri atas: Pindahkan 0,1 mL kaldu Demi-Fraser. Masukkan secara
langsung pada agar terpilih yang dijelaskan dalam ISO 11290-1
Opsi 3: Menggunakan sensor asam nukleat yang dijelaskan dalam standar EN ISO 7218
diisolasi, dari agar terpilih (lihat Opsi 1 atau 2).
Opsi 4: Menggunakan metode yang bersertifikasi VALIDASI NF lainnya, prinsip yang digunakan tidak boleh sama dengan
Deteksi Molekuler 3M untuk Pengujian 2 Listeria. Protokol lengkap yang dijelaskan untuk metode validasi kedua ini harus
digunakan. Seluruh langkah sebelum permulaan konfirmasi untuk kedua metode harus sama.
Bilamana hasil yang ditimbulkan bertentangan (dugaan positif dengan metode alternatif, tidak dibuktikan oleh salah satu
cara yang dijelaskan di atas), laboratorium wajib mengikuti langkah yang diperlukan untuk memastikan validitas hasil yang
diperoleh.
Catatan: Bahkan sampel negatif tidak akan memberikan tampilan nol, karena sistem dan amplifikasi reagen Deteksi
Molekuler 3M untuk Pengujian 2 Listeria memiliki tampilan "latar belakang" data unit cahaya relatif (RLU).
20 µL
, dimulai dengan memindahkannya dari kaldu pengaya primer ke
(1, 2, 3)
mulai pengayaan Demi-Fraser
(3)
.
(3)
10
ID (Bahasa Indonesia)
yang dijalankan pada koloni yang
(5)