3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 147

Υπόδειξη: Για την ελαχιστοποίηση του κινδύνου ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων λόγω διασταυρούμενης
μόλυνσης, ποτέ μην ανοίγετε τους δοκιμαστικούς σωλήνες αντιδραστηρίων που περιέχουν ενισχυμένο
DNA. Αυτό συμπεριλαμβάνει δοκιμαστικούς σωλήνες Ελέγχου Αντιδραστηρίου, Αντιδραστηρίου και Πίνακα
Ελέγχου. Απορρίπτετε πάντοτε τους σφραγισμένους δοκιμαστικούς σωλήνες αντιδραστηρίου μουλιάζοντάς
τους σε διάλυμα οικιακού λευκαντικού 1–5% (όγκο κατ' όγκο σε νερό) για 1 ώρα και μακριά από την περιοχή
προετοιμασίας της δοκιμασίας.
Αποτελέσματα και ερμηνεία
Ένας αλγόριθμος ερμηνεύει την καμπύλη παροχής φωτός που προκύπτει από την ανίχνευση της ενίσχυσης
νουκλεϊνικών οξέων. Τα αποτελέσματα αναλύονται αυτόματα από το λογισμικό και κωδικοποιούνται χρωματικά
με βάση το αποτέλεσμα. Ένα Θετικό ή Αρνητικό αποτέλεσμα καθορίζεται μέσω ανάλυσης ενός αριθμού μοναδικών
παραμέτρων καμπύλης. Τα υποθετικά θετικά αποτελέσματα αναφέρονται σε πραγματικό χρόνο, ενώ τα Αρνητικά και
τα αποτελέσματα Προς Επιθεώρηση εμφανίζονται μετά την ολοκλήρωση της διαδικασίας.
Πιθανά θετικά δείγματα πρέπει να επιβεβαιώνονται σύμφωνα με τις τυπικές διαδικασίες λειτουργίας του
εργαστηρίου ή ακολουθώντας την κατάλληλη επιβεβαίωση μεθόδου αναφοράς
από τον πρωτογενή εμπλουτισμό στους ζωμούς δευτερεύοντος εμπλουτισμού (αν εφαρμόζεται), ακολουθούμενη
από μετέπειτα εξέταση σε αντικειμενοφόρο και επιβεβαίωση των απομονωμάτων χρησιμοποιώντας τις κατάλληλες
βιοχημικές και οροδιαγνωστικές μεθόδους.
Στο πλαίσιο της διαδικασίας NF VALIDATION, όλα τα δείγματα που αναγνωρίζονται ως θετικά από την 3M Δοκιμασία
Μοριακής Ανίχνευσης Listeria 2 πρέπει να επιβεβαιωθούν με έναν από τους παρακάτω ελέγχους:
Επιλογή 1: Χρήση του προτύπου ISO 11290-1
Επιλογή 2: Εφαρμογή μιας μεθόδου επιβεβαίωσης που περιλαμβάνει τα ακόλουθα: Μεταφορά 0,1 mL ζωμού
Demi-Fraser. Γραμμή απευθείας πάνω στο εκλεκτικό άγαρ όπως περιγράφεται στο ISO 11290-1
Επιλογή 3: Χρήση ιχνηθετών νουκλεϊκού οξέος όπως περιγράφεται στο πρότυπο EN ISO 7218
πραγματοποιείται σε απομονωμένες αποικίες, από εκλεκτικό άγαρ (βλ. Επιλογές 1 ή 2).
Επιλογή 4: Χρήση άλλης πιστοποιημένης μεθόδου NF VALIDATION, η αρχή της οποίας πρέπει να είναι διαφορετική
από την 3M Δοκιμασία Μοριακής Ανίχνευσης Listeria 2. Πρέπει να χρησιμοποιηθεί ολόκληρο το πρωτόκολλο που
περιγράφεται για αυτήν τη δεύτερη επικυρωμένη μέθοδο. Όλα τα βήματα πριν από την έναρξη της επιβεβαίωσης
πρέπει να είναι κοινά και για τις δύο μεθόδους.
Σε περίπτωση ασυμφωνίας αποτελεσμάτων (πιθανώς θετικά με την εναλλακτική μέθοδο, μη επιβεβαιωμένα από
έναν από τους τρόπους που περιγράφονται παραπάνω), το εργαστήριο πρέπει να ακολουθήσει τα παρακάτω
βήματα, για να διασφαλίσει την εγκυρότητα του ληφθέντος αποτελέσματος.
Σημείωση: Ακόμα και ένα αρνητικό δείγμα δεν θα δώσει μηδενική ένδειξη, καθώς το σύστημα και τα
αντιδραστήρια ενίσχυσης 3M Δοκιμασίας Μοριακής Ανίχνευσης Listeria 2 έχουν μια σχετική μονάδα φωτός (RLU)
"υποβάθρου".
Στη σπάνια περίπτωση ασυνήθιστης παροχής φωτός, ο αλγόριθμος το επισημαίνει ως "Προς Επιθεώρηση". Η
3M συνιστά στο χρήστη να επαναλάβει τη δοκιμασία για όλα τα δείγματα Προς Επιθεώρηση. Εάν το αποτέλεσμα
συνεχίζει να είναι Προς Επιθεώρηση, προχωρήστε στον έλεγχο επιβεβαίωσης χρησιμοποιώντας τη μέθοδο που
προτιμάτε ή όπως καθορίζεται από τους τοπικούς κανονισμούς.
Εάν έχετε ερωτήσεις σχετικά με συγκεκριμένες εφαρμογές ή διαδικασίες, παρακαλούμε επισκεφθείτε τη διεύθυνση
www.3M.com/foodsafety ή επικοινωνήστε με τον τοπικό σας αντιπρόσωπο ή διανομέα της 3Μ.
Παράρτημα A. Διακοπή πρωτοκόλλου: Αποθήκευση και επανέλεγχος θερμικά κατεργασμένων λυμάτων
1. Για να αποθηκεύσετε ένα θερμικά κατεργασμένο λύμα, επαναπωματίστε το δοκιμαστικό σωλήνα λύσης με ένα
καθαρό πώμα (βλ. ΛΥΣΗ, 4.5)
2. Αποθηκεύστε στους 4 έως 8 °C για έως 72 ώρες.
3. Προετοιμάστε ένα αποθηκευμένο δείγμα για ενίσχυση αναστρέφοντας 2–3 φορές για να αναμίξετε.
4. Αφαιρέστε το πώμα από τους δοκιμαστικούς σωλήνες.
5. Τοποθετήστε τους δοκιμαστικούς σωλήνες με το αναμεμιγμένο λύμα στο 3M Ένθετο για Υποδοχή Σωλήνων
Θερμαντήρα Μοριακής Ανίχνευσης και θερμάνετε στους 100 ±1 °C για 5 ±1 λεπτά.
6. Αφαιρέστε το στατώ των δοκιμαστικών σωλήνων ΣΛ από το ένθετο θέρμανσης και αφήστε το να κρυώσει στο 3M
Ένθετο Υποδοχής Σωλήνων για Ψύξη Μοριακής Ανίχνευσης για τουλάχιστον 5 λεπτά και μέγιστο 10 λεπτά.
7. Συνεχίστε το πρωτόκολλο στην ενότητα 'Ενίσχυση' που περιγράφεται λεπτομερώς παραπάνω.
ξεκινώντας από τον εμπλουτισμό Demi-Fraser
(3)
12
EL (Ελληνικά)
, αρχίζοντας με τη μεταφορά
(1, 2, 3)
.
(3)
, που
(5)