3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 48

6. Ripetere i punti da 4.1 a 4.6 fin quando è necessario, per il numero di campioni da testare.
7. Una volta trasferiti tutti i campioni, trasferire 20 µl di NC (mezzo di arricchimento sterile, ad es. brodo Demi-Fraser) in un
tubo LS. Non utilizzare l'acqua come NC (Controllo negativo).
8. Verificare che la temperatura dell'Inserto del blocco di calore per il sistema di rilevamento molecolare 3M sia 100 ±1 °C.
9. Posizionare la rastrelliera per tubi LS, scoperta, nell'Inserto del blocco di calore per il sistema di rilevamento molecolare
3M e riscaldare per 15 ±1 minuti. Durante il riscaldamento, la soluzione LS passerà dall'essere di colore rosa (freddo) a
giallo (caldo).
I campioni non correttamente trattati termicamente durante la fase di lisi dell'analisi possono essere considerati un
potenziale rischio biologico e NON dovranno essere inseriti nello Strumento per l'analisi molecolare 3M.
10. Rimuovere la rastrelliera dei tubi LS scoperta dal blocco di calore e consentire il raffreddamento nel blocco di
raffreddamento estraibile per il sistema di rilevamento molecolare 3M per almeno 5 minuti e per un massimo di 10
minuti. Il supporto per il pozzetto di raffreddamento molecolare 3M, utilizzato a temperatura ambiente senza il vassoio
per blocco di raffreddamento estraibile per il sistema rilevamento molecolare 3M, deve essere posto direttamente sul
banco del laboratorio. Quando è fredda, la soluzione lisi torna a essere di colore rosa.
11. Rimuovere la rastrelliera per tubi LS dal blocco di raffreddamento estraibile per il sistema di rilevamento molecolare 3M.
Amplificazione
1. È necessario un tubo di reagente per ciascun campione e NC.
1.1 Le strisce di tubi possono essere tagliate al numero di tubi desiderato. Selezionare il numero necessario di singoli
tubi di reagente o di strisce da 8 tubi.
1.2 Posizionare i tubi di reagente in una rastrelliera vuota.
1.3 Evitare di spostare le pastiglie di reagente poste sul fondo dei tubi.
2. Selezionare 1 tubo di Controllo reagente (RC) e posizionarlo nella rastrelliera.
3. Al fine di evitare la contaminazione crociata, rimuovere i tappi da una striscia di tubi di reagente alla volta e utilizzare
una nuova punta di pipetta per ciascuna fase di trasferimento.
4. Trasferire il lisato nei tubi di reagente e nel tubo RC come descritto di seguito:
Trasferire prima ciascun lisato campione nei tubi di reagente singoli, quindi trasferire il NC. Idratare il tubo RC per
ultimo.
5. Utilizzare lo Strumento di inserimento/rimozione del tappo per il rilevamento molecolare 3M™ - Reagente per
rimuovere il tappo dai tubi di reagente, una striscia di tubi di reagente alla volta. Gettare il tappo.
5.1 Trasferire 20 µl di lisato campione dalla metà superiore del liquido (evitare la precipitazione) nel tubo LS
nel tubo del reagente corrispondente. Erogare con un'inclinazione per evitare il movimento delle pastiglie.
Miscelare pipettando delicatamente su e giù per 5 volte.
5.2 Ripetere il punto 5.1 finché ciascun lisato campione singolo non è stato aggiunto a un tubo di reagente
corrispondente nella striscia.
00:15:00
99-101ºC
00:05:00
9
IT (Italiano)
20 µl
20-25ºC