Manipulation Et Stockage Des Prélèvements; Prélèvements Ffpe; Échantillons D'arn - Qiagen therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit Mode D'emploi

Manipulation et stockage des prélèvements
Prélèvements FFPE
Le therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit est conçu pour une utilisation avec des échantillons
d'ARN extraits de prélèvements de CU FFPE effectués à l'aide du RNeasy DSP FFPE Kit
Échantillons d'ARN
Une fois extraits, les échantillons d'ARN doivent être soit testés immédiatement avec le
therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit, soit stockés entre –90 et –65 °C. Ne pas dépasser un
maximum de cinq cycles de congélation/décongélation.
Pour préparer des échantillons de tissu à l'extraction d'ARN :
À l'aide d'un microtome, faire des coupes sériées de 4 à 5 µm dans le bloc d'échantillon
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FFPE et les placer sur des lames en verre.
Demander à un professionnel expérimenté (p. ex. un pathologiste) d'évaluer une coupe
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colorée à l'hématoxyline-éosine (H&E) afin de confirmer la présence d'une tumeur et de
la délimiter. Une lame adjacente aux coupes à extraire est nécessaire pour identifier la
surface tumorale et guider la macrodissection, le cas échéant.
Les coupes colorées H&E ne doivent pas être utilisées pour l'extraction d'ARN.
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Conserver tous les blocs et toutes les lames FFPE à température ambiante (entre 15 et 25 °C).
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La quantité de prélèvements FFPE nécessaire est équivalente à une épaisseur de lame
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de 4 à 5 µm avec une surface tumorale totale entre 100 mm
Cette quantité peut être obtenue en combinant les tissus de plusieurs lames (Figure 3).
21 Mode d'emploi (manuel) du therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit 08/2019
et 500 mm (inclusive).
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