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Qiagen QIAamp DSP Virus Kit Mode D'emploi

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Mode d'emploi (Manuel) du
QIAamp
Version 2
Pour utilisation diagnostique in vitro
Pour utilisation avec le QIAamp
R1
Sample to Insight
DSP Virus Kit
®
60704
QIAGEN GmbH, QIAGEN Strasse 1, 40724 Hilden, ALLEMAGNE
1127541FR
DSP Virus Kit
®
Juin 2022
50

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Sommaire des Matières pour Qiagen QIAamp DSP Virus Kit

  • Page 1 Juin 2022 Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit ® Version 2 Pour utilisation diagnostique in vitro Pour utilisation avec le QIAamp DSP Virus Kit ® 60704 QIAGEN GmbH, QIAGEN Strasse 1, 40724 Hilden, ALLEMAGNE 1127541FR Sample to Insight...

  • Page 2: Table Des Matières

    Réactifs supplémentaires .................. 13 Consommables ....................13 Équipement ....................13 Avertissements et précautions ..................14 Informations de sécurité ................... 14 Informations en cas d’urgence ................. 15 Précautions ....................16 Mise au rebut ....................17 Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 3 Limitations ........................ 35 Caractéristiques de performances ................36 Guide de dépannage ....................37 Symboles ......................... 42 Annexe ........................45 Informations de commande ..................46 Historique des révisions du document ................47 Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 4: Utilisation Prévue

    à partir d’échantillons de plasma ou de sérum humains. Le QIAamp DSP Virus Kit utilise une technologie à base de membranes de silice (technologie QIAamp) pour isoler et purifier les acides nucléiques viraux à partir d’échantillons de plasma ou de sérum humains.

  • Page 5: Description Et Principe

    échantillons potentiellement infectieux. Facile à mettre en œuvre, la procédure QIAamp DSP Virus convient au traitement simultané de plusieurs échantillons. Le QIAamp DSP Virus Kit peut servir à l’isolement d’ARN et d’ADN viraux provenant d’un large éventail de virus à ARN ou à...

  • Page 6: Élimination Des Contaminants Résiduels

    Remarque : la stabilité des éluats dépend nettement de divers facteurs et concerne une application en aval spécifique. Elle a été évaluée pour le QIAamp DSP Virus Kit avec des applications en aval types. L’utilisateur doit consulter le mode d’emploi de l’application en...

  • Page 7: Rendement Et Qualité Des Acides Nucléiques Viraux

    Afin d’obtenir les meilleurs niveaux de sensibilité dans les réactions d’amplification, il peut être nécessaire d’ajuster la quantité d’ARN vecteur ajoutée au tampon de lyse (AL). Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 8: Ajout De Contrôles Internes

    200 nucléotides, car les molécules plus petites ne sont pas récupérées de manière efficace. Consulter les consignes du fabricant pour déterminer la concentration optimale. L’utilisation d’une concentration différente de celle recommandée peut diminuer l’efficacité de l’amplification. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 9 Placer une colonne QIAamp MinElute dans un tube ET. Ajouter 20 µl ou 60 µl d’AVE. Incuber 3 minutes à température ambiante. Centrifuger pendant 1 minute à 14 000 tr/min. Acides nucléiques viraux purs Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 10: Résumé Et Explications

    Résumé et explications Le QIAamp DSP Virus Kit utilise une technologie éprouvée d’extraction et de purification simultanées de l’ADN et de l’ARN viraux. La procédure QIAamp DSP Virus associe les propriétés de liaison sélective de la membrane à base de silice à des volumes d’élution minimaux de 20 µl ou 60 µl.

  • Page 11: Matériel Fourni

    * Contient du chlorhydrate de guanidine. Non compatible avec les désinfectants contenant de l’eau de Javel. Voir page 14 pour lire les informations de sécurité. Contient de l’azoture de sodium comme conservateur † Le volume de resuspension est de 4,4 ml ‡ Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 12: Composants Du Kit

    QIAGEN Protease (QP) Subtilisine ≥ 90 à ≤ 100 Chlorhydrate de guanidine ≥ 30 à < 50 Acide maléique ≥ 0,1 à < 1 Chlorhydrate de guanidine ≥ 50 à < 70 Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 13: Matériel Nécessaire, Mais Non Fourni

    * Ne pas utiliser d’alcool dénaturé contenant d’autres substances telles que le méthanol ou la méthyléthylcétone. † Avant utilisation, s’assurer que les instruments ont été vérifiés et étalonnés conformément aux recommandations du fabricant. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 14: Avertissements Et Précautions

    PDF, pratique et compact, à l’adresse www.qiagen.com/safety, où il est possible de trouver, de consulter et d’imprimer les FDS de chaque kit et composant de kit QIAGEN. ATTENTION : ne pas verser d'agents chlorés ou de solutions acides sur les déchets de la préparation d’échantillon.

  • Page 15: Informations En Cas D'urgence

    Si les flacons des tampons sont abîmés ou fuient, porter des gants et des lunettes de  sécurité au moment de les jeter afin d’éviter tout risque de lésion corporelle. QIAGEN n’a pas testé les déchets liquides générés par la procédure QIAamp DSP Virus  pour les matières infectieuses résiduelles. Par conséquent, des précautions universellement reconnues (port de gants, blouses et protections oculaires) pour la manipulation de matériel source d’origine humaine potentiellement infectieux doivent être...

  • Page 16: Précautions

    être facilement enlevées. Continuer à rincer. En cas d’exposition prouvée ou suspectée : Appeler immédiatement un CENTRE ANTIPOISON ou un médecin. Transporter la victime à l’extérieur et la maintenir dans une position où elle peut confortablement respirer. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 17: Mise Au Rebut

    Pour plus d’informations, consulter les fiches de données de sécurité (FDS) appropriées. Elles sont disponibles en ligne au format PDF à l’adresse www.qiagen.com/safety, où il est possible de trouver, de consulter et d’imprimer les FDS de chaque kit et composant de kit QIAGEN. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 18: Conservation Et Manipulation Des Réactifs

    L’ARN vecteur lyophilisé peut être conservé à température ambiante jusqu’à la date d’expiration indiquée sur la boîte du kit. Le QIAGEN Protease (QP) lyophilisé peut être conservé à température ambiante jusqu’à la date d’expiration sans altération des performances. Stabilité à l’utilisation L’ARN vecteur peut uniquement être dissous dans le tampon d’élution (AVE).
  • Page 19 Le QIAGEN Protease (QP) reconstitué dans le solvant pour protéase (PS) est stable jusqu’à 1 an s’il est conservé entre 2 et 8 °C, mais uniquement jusqu’à la date d’expiration. Éviter de garder la solution mère QIAGEN Protease (QP) à température ambiante pendant des périodes prolongées.

  • Page 20: Prélèvement, Conservation Et Manipulation Des Échantillons

    être décongelés plus d’une fois. processus congélation/décongélation répété entraîne la dénaturation et la précipitation des protéines, ce qui a pour résultat des titres viraux réduits et, par conséquent, des rendements réduits Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 21 La centrifugation à une force g faible ne réduit pas les titres viraux. Remarque : conformément à des études des interférences types pour le QIAamp DSP Virus Kit et à la norme ISO 20186-2:2019(E), l’héparine provenant de tubes de prélèvement sanguin peut avoir une incidence sur la pureté...

  • Page 22: Remarques Importantes

    QIAGEN ou le distributeur local. En cas de déversement de liquide, se reporter à la section « Avertissements et précautions » à la page 14. Ne pas utiliser de composants endommagés.

  • Page 23: Manipulation Des Colonnes Qiaamp Minelute

    Préparation des réactifs et tampons Préparation de l’ARN Lors de la préparation de l’ARN viral, effectuer rapidement les étapes manuelles de la procédure et lire la section « Annexe » page 45 avant de commencer. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 24: Préparation Du Qiagen Protease (Qp)

    L’utilisation d’une concentration différente de celle conseillée peut fausser les résultats. Lors du calcul de la quantité correcte de contrôle interne, tenir compte du volume de départ de l’échantillon et du volume d’élution. Garder à l’esprit que le QIAamp DSP Virus Kit utilise un volume d’échantillon de départ de 500 µl.
  • Page 25 = volume de mélange ARN vecteur/tampon d’élution (AVE) à ajouter au tampon de lyse (AL) Mélanger doucement en retournant le tube 10 fois. Pour éviter la formation de mousse, ne pas vortexer. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 26 (AL). L’utilisation de quantités d’ARN vecteur inférieures à 5,6 µg doit être validée pour chaque type spécifique d’échantillon et de dosage en aval. * Si le contrôle interne est utilisé, réduire le volume de tampon de lyse (AL) en conséquence. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 27: Préparation Du Tampon De Lavage 2 (Aw2)

    Contient un sel chaotropique. Respecter les mesures de sécurité appropriées du laboratoire et porter des gants lors des manipulations. Non compatible avec les désinfectants contenant de l’eau de Javel. Voir page 14 pour lire les informations de sécurité. Contient de l’azoture de sodium comme conservateur. † Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 28: Configuration Du Système De Vide Qiavac 24 Plus

    Veiller à configurer correctement l’élément d’extension de colonne (EXT), la colonne QIAamp MinElute, le VacConnector (VC) et la VacValve (voir la Figure 1). Figure 1. Assemblage des composants du QIAamp DSP Virus Kit pour le traitement sous vide des échantillons : 1. VacValve (fournie avec le système de vide) 3.
  • Page 29 Figure 2. Schéma pour le marquage des tubes de lyse (LT), des tubes d’élution (ET) et des colonnes QIAamp MinElute utilisés sur le système de vide QIAvac 24 Plus. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 30: Protocole : Extraction Et Purification Des Acides Nucléiques Viraux Dans Le Plasma Et Le Sérum

    Préchauffer un bloc chauffant à 56 °C pour les étapes 4 et 17.  Vérifier que le tampon de lavage 1 (AW1) le tampon de lavage 2 (AW2) et le QIAGEN  Protease (QP) ont bien été préparés suivant les consignes de la section « Points importants avant de commencer »...
  • Page 31 Procédure 1. Transférer à la pipette 75 µl de QIAGEN Protease (QP) dans un tube de lyse (LT). Avant de l’utiliser, vérifier la date limite d’utilisation de la protéase reconstituée. 2. Ajouter 500 µl de plasma ou de sérum au tube de lyse (LT).
  • Page 32 Retirer délicatement l’élément d’extension de colonne (EXT), le mettre au rebut, puis fermer la valve du système de vide. Après avoir passé le tampon de lavage 1 (AW1) à travers la colonne QIAamp MinElute, ouvrir la valve et laisser rentrer l’air. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 33 60 µl de tampon d’élution (AVE) (selon le dosage en aval) au centre de la membrane. Il est important d’utiliser un nouveau tube d’élution pour éviter une contamination avec les tampons de lavage résiduels susceptible d’inhiber le dosage en aval. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 34: Contrôle Qualité

    Contrôle qualité En accord avec le Total Quality Management System certifié de QIAGEN, chaque lot du QIAamp DSP Virus Kit a été testé dans les spécifications prédéterminées afin d’assurer une qualité égale du produit. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 35: Limitations

    Afin de limiter les risques d’impact négatif sur les résultats diagnostiques, des contrôles appropriés doivent être utilisés pour les applications en aval. Tous les résultats diagnostiques générés doivent être interprétés en tenant compte des autres observations cliniques ou résultats biologiques disponibles. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 36: Caractéristiques De Performances

    Caractéristiques de performances Les caractéristiques de performances applicables sont disponibles sous l’onglet Resource, sur la page du produit, à l’adresse www.qiagen.com. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 37: Guide De Dépannage

    également la page de la foire aux questions dans notre centre d’assistance technique à l’adresse suivante : www.qiagen.com/FAQ/FAQList.aspx. Les scientifiques des services techniques QIAGEN seront ravis de répondre à toutes les questions sur les informations et/ou protocoles figurant dans ce manuel ou sur les technologies d’échantillons et de dosage (pour les coordonnées, visitez le site www.qiagen.com).
  • Page 38 L’utilisation d’éthanol refroidi sur glace en cours de lyse peut permettre de diminuer le risque d’obstruction de la membrane. Il est en outre indispensable d’ajouter les tampons pour la lyse dans le bon ordre, indiqué précédemment. Ne pas ajouter de QIAGEN Protease (QP) directement dans le tampon de lyse (AL).
  • Page 39 L’ADN ne réagit pas bien dans les réactions en aval Lyse des Si le QIAGEN Protease (QP) a été soumis à des températures élevées pendant une échantillons période prolongée, il peut devenir moins actif. Répéter la procédure avec de nouveaux incomplète...
  • Page 40 Il est important d’utiliser un nouveau tube d’élution pour éviter une contamination avec les tampons de lavage résiduels susceptible d’inhiber le dosage en aval. conformément à des études des interférences types pour le QIAamp DSP Virus Kit et à la norme ISO 20186-2:2019(E), l’héparine provenant de tubes de prélèvement sanguin peut avoir une incidence sur la pureté...
  • Page 41 De l’ARN vecteur peut également être inclus dans certains réactifs de contrôle interne des dosages en aval du commerce. Dans ce cas, consulter la notice d’utilisation du fabricant du dosage en aval. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 42: Symboles

    (c.-à-d. étiquette de composant) Composants Volume Contient Numéro Code article international (Global Trade Item Number, GTIN) R désigne une révision du mode d’emploi et n représente le numéro de révision Limites de température Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 43 Ouvrir à la livraison ; conserver les colonnes QIAamp MinElute entre 2 et 8 °C Noter la date du jour sur le flacon après avoir ajouté l’éthanol ____ Ajouter Lyophilisé Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 44 Symbole Définition du symbole Reconstituer dans Éthanol Chlorhydrate de guanidine Acide maléique Subtilisine Mène à Identificateur unique d’appareil Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 45: Annexe

    échantillons d’ARN afin d’éviter une contamination par des RNases due à la peau ou à l’équipement de laboratoire poussiéreux. Changer souvent de gants et fermer les tubes immédiatement après utilisation. Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

  • Page 46: Informations De Commande

    24 VacValves. Pour obtenir des informations actualisées sur les licences et les clauses de non-responsabilité spécifiques aux produits, consultez les instructions d’utilisation des kits QIAGEN respectifs. Les modes d’emploi des kits QIAGEN sont disponibles sur le site www.qiagen.com...

  • Page 47: Historique Des Révisions Du Document

     Ajout de la section Annexe  Ajout de la section Guide de dépannage  Mise à jour de la section Symboles  Ajout de la section Informations de commande  Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 48 Cette page est intentionnellement laissée vierge Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 49 Cette page est intentionnellement laissée vierge Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 50 Cette page est intentionnellement laissée vierge Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...
  • Page 51 été rigoureusement testés ou optimisés par QIAGEN. QIAGEN ne saurait être tenu pour responsable de leur utilisation et n’offre aucune garantie que ces protocoles ne portent pas atteinte aux droits de tiers. 2. En dehors des licences énoncées expressément, QIAGEN n’offre aucune garantie indiquant que ce panel et/ou sa ou ses utilisations ne violent pas les droits de tiers.
  • Page 52 Pour commander, www.qiagen.com/shop | Assistance technique, support.qiagen.com | Site Web, www.qiagen.com HB-3032-001 Mode d’emploi (Manuel) du QIAamp DSP Virus Kit 06/2022...

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