Qiagen therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit Mode D'emploi page 30

1 2
Tube 1 Tube 9
A
Mut-1 Mut-1
Tube 2 Tube 10
B
Mut-2 Mut-2
Tube 3 Tube 11
C
Fus-1 Fus-1
Tube 4 Tube 12
D
Fus-2 Fus-2
Tube 5 Tube 13
E
Mut-1 Mut-1
Tube 6 Tube 14
F
Mut-2 Mut-2
Tube 7 Tube 15
G
Fus-1 Fus-1
Tube 8 Tube 16
H
Fus-2 Fus-2
Figure 4. Schéma de pipetage du mélange réactionnel de PCR. Rangées A et E (orange) : Mélange réactionnel des
mutations-1. Rangées B et F (pourpres) : Mélange réactionnel des mutations-2. Rangées C et G (jaunes) : Mélange
réactionnel des fusions-1. Rangées D et H (vertes) : Mélange réactionnel des fusions-2. Les couleurs correspondent aux
bouchons des tubes de PCR dans le kit.
7. Mélanger au vortex les échantillons d'ADNc pendant 3 secondes, puis centrifuger
brièvement pour récupérer les gouttelettes sur les parois et les couvercles des tubes.
8. Ajouter 5 µl de NTC, d'échantillon à tester ou de contrôle positif à partir de la réaction
de transcription inverse aux tubes de PCR en barrettes de 0,1 ml, conformément au
schéma de pipetage dans la Figure 5. Régler la pipette sur 5 µl, homogénéiser 5
à 10 fois par aspiration-refoulement et fermer les tubes immédiatement.
Remarque : Dans la mesure du possible, l'addition de la matrice d'ADNc du contrôle
positif doit être effectuée dans une zone différente ou dans un autre laboratoire éloigné
de la paillasse où sont ajoutés le NTC et l'ADNc des échantillons. Cela permet de
réduire le risque de contamination des échantillons.
Mode d'emploi (manuel) du therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit 08/2019
Plaque de 72 puits
3 4
Tube 17 Tube 25 Tube 33
Mut-1 Mut-1 Mut-1
Tube 18 Tube 26 Tube 34
Mut-2 Mut-2 Mut-2
Tube 19 Tube 27 Tube 35
Fus-1 Fus-1 Fus-1
Tube 20 Tube 28 Tube 36
Fus-2 Fus-2 Fus-2
Tube 21 Tube 29 Tube 37
Mut-1 Mut-1 Mut-1
Tube 22 Tube 30 Tube 38
Mut-2 Mut-2 Mut-2
Tube 23 Tube 31 Tube 39
Fus-1 Fus-1 Fus-1
Tube 24 Tube 32 Tube 40
Fus-2 Fus-2 Fus-2
5 6 7
Tube 41 Tube 49
Mut-1 Mut-1
Tube 42 Tube 50
Mut-2 Mut-2
Tube 43 Tube 51
Fus-1 Fus-1
Tube 44 Tube 52
Fus-2 Fus-2
Tube 45 Tube 53
Mut-1 Mut-1
Tube 46 Tube 54
Mut-2 Mut-2
Tube 47 Tube 55
Fus-1 Fus-1
Tube 48 Tube 56
Fus-2 Fus-2
8 9
Tube 57 Tube 65
Mut-1 Mut-1
Tube 58 Tube 66
Mut-2 Mut-2
Tube 59 Tube 67
Fus-1 Fus-1
Tube 60 Tube 68
Fus-2 Fus-2
Tube 61 Tube 69
Mut-1 Mut-1
Tube 62 Tube 70
Mut-2 Mut-2
Tube 63 Tube 71
Fus-1 Fus-1
Tube 64 Tube 72
Fus-2 Fus-2
30