Qiagen therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit Mode D'emploi page 10

Marqueur
Quencher
Figure 2. Principe de la réaction TaqMan.
L'augmentation du signal de fluorescence n'est détectée que si la séquence cible, qui est
complémentaire des amorces et de la sonde, est présente dans la réaction. Si la séquence
cible est absente, la dégradation de la sonde n'a pas lieu, le marqueur fluorescent ne se
dissocie pas du quencher et donc aucune fluorescence n'est observée. Le nombre de cycles
de PCR nécessaires pour détecter un signal fluorescent au-dessus d'un niveau prédéterminé
est appelé cycle seuil (C
début de la réaction, permettant de définir la limite de sensibilité du test.
Mode d'emploi (manuel) du therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit 08/2019
Sonde spécifique
Produit de la PCR Taq polymérase
) et est directement proportionnel à la quantité de cible présente au
T
Hybridation
Hybridation de la sonde
et des amorces
Polymérisation
Déplacement du brin
Dégradatio
Entraîne la libération du quencher
et l'émission du signal de fluorescence
du marqueur
Polymérisation terminée
Produit de la PCR achevé et accumulation du signal
de fluorescence à chaque cycle
Amorces sens et antisens
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