Qiagen therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit Mode D'emploi page 31

1 2
Tube 1 Tube 9
A
PC Échantillon 1 Échantillon 3
Tube 2 Tube 10
B
PC Échantillon 1 Échantillon 3
Tube 3 Tube 11
C
PC Échantillon 1 Échantillon 3
Tube 4 Tube 12
D
PC Échantillon 1 Échantillon 3
Tube 5 Tube 13
E
NTC Échantillon 2 Échantillon 4
Tube 6 Tube 14
F
NTC Échantillon 2 Échantillon 4
Tube 7 Tube 15
G
NTC Échantillon 2 Échantillon 4
Tube 8 Tube 16
H
NTC Échantillon 2 Échantillon 4
Figure 5. Schéma de pipetage des échantillons ont testés avec le therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit. Les couleurs
correspondent aux bouchons des tubes de PCR dans le kit.
9. Vérifier que le mélange réactionnel de PCR est au fond des tubes de PCR en barrettes de
0,1 ml.
10. Lancer le therascreen FGFR FFPE Assay Profile version 1.0.1 dans le logiciel Rotor-
Gene AssayManager version 2.1. Voir le Tableau 5 pour les conditions de réalisation
des cycles.
11. Placer les quatre barrettes de tubes de PCR dans le rotor à 72 puits. Prendre des
précautions toutes particulières pour que les tubes soient transférés aux bonnes positions
sur le rotor à 72 puits (la position des tubes dans le rotor doit être la même que la
position des tubes dans le bloc de chargement).
Remarque : Placer un tube vide bouché dans toutes les positions non utilisées du rotor.
Cela permet de maintenir l'efficacité thermique de l'appareil Rotor-Gene Q
MDx 5plex HRM.
12. Placer le rotor à 72 puits dans l'appareil Rotor-Gene Q MDx 5plex HRM. Vérifier que la
bague de verrouillage (fournie avec l'appareil Rotor-Gene Q MDx 5plex HRM) est bien
fixée au-dessus du rotor pour que les tubes ne bougent pas lors du cycle.
13. Pour démarrer le cycle de real-time PCR, suivre les instructions dans la section
« Utilisation du logiciel Rotor-Gene AssayManager version 2.1 » page 32.
31
Plaque de 72 puits
3 4
Tube 17 Tube 25 Tube 33
Échantillon 5 Échantillon 7
Tube 18 Tube 26 Tube 34
Échantillon 5 Échantillon 7
Tube 19 Tube 27 Tube 35
Échantillon 5 Échantillon 7
Tube 20 Tube 28 Tube 36
Échantillon 5 Échantillon 7
Tube 21 Tube 29 Tube 37
Échantillon 6 Échantillon 8
Tube 22 Tube 30 Tube 38
Échantillon 6 Échantillon 8
Tube 23 Tube 31 Tube 39
Échantillon 6 Échantillon 8
Tube 24 Tube 32 Tube 40
Échantillon 6 Échantillon 8
Mode d'emploi (manuel) du therascreen FGFR RGQ RT-PCR Kit 08/2019
5 6
Tube 41 Tube 49
Échantillon 9 Échantillon 11
Tube 42 Tube 50
Échantillon 9 Échantillon 11
Tube 43 Tube 51
Échantillon 9 Échantillon 11
Tube 44 Tube 52
Échantillon 9 Échantillon 11
Tube 45 Tube 53
Échantillon 10 Échantillon 12
Tube 46 Tube 54
Échantillon 10 Échantillon 12
Tube 47 Tube 55
Échantillon 10 Échantillon 12
Tube 48 Tube 56
Échantillon 10 Échantillon 12
7 8
Tube 57
Échantillon 13 Échantillon 15
Tube 58
Échantillon 13 Échantillon 15
Tube 59
Échantillon 13 Échantillon 15
Tube 60
Échantillon 13 Échantillon 15
Tube 61
Échantillon 14 Échantillon 16
Tube 62
Échantillon 14 Échantillon 16
Tube 63
Échantillon 14 Échantillon 16
Tube 64
Échantillon 14 Échantillon 16
9
Tube 65
Tube 66
Tube 67
Tube 68
Tube 69
Tube 70
Tube 71
Tube 72