Limpieza De La Columna/Incremento De La Vida Útil De La Columna: Columnas Hilic - Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC Guide D'utilisation

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  • FRANÇAIS, page 26
Limpieza de la columna/incremento de la vida útil de la columna:
columnas HILIC
Es necesario filtrar las muestras antes de su inyección en la columna.
Esto es particularmente importante para la columna ZORBAX RRHD HILIC
Plus, pues la frita de entrada de la columna tiene un diámetro nominal de
0,5 µm y las muestras deben filtrase con un filtro de muestras de 0,2 µm.
Si parece que el flujo de disolvente está restringido (una retropresión de
la columna inusualmente alta), verifique primero si el flujo de disolvente
presenta obstrucciones hasta la entrada de la columna Si la restricción está
antes de la columna, cambie el trozo de tubo correspondiente o el filtro
que esté obstruido. Si la columna está obstruida, la InfinityLab Poroshell
120 HILIC puede purgarse con retroflujo con 20-30 volúmenes de columna
de fase móvil. La columna RRHD HILIC no puede purgarse con retroflujo.
Para eliminar de la columna los materiales muy retenidos, lave la columna
con un disolvente fuerte que, en modo HILIC, es el agua.
Las columnas InfinityLab Poroshell HILIC-OH5 pueden regenerarse lavando
con acetonitrilo:acetato de amonio 50 mM 50/50 con flujo reducido durante
al menos 3 horas. A continuación, equilibre con la fase móvil. Las columnas
InfinityLab Poroshell HILIC-Z pueden regenerarse lavando con 50/50
acetonitrilo:acetato de amonio 10 mM con un flujo operativo del 20 % del
normal durante al menos 3 horas. A continuación, equilibre con la fase móvil.
Recomendaciones para el almacenamiento: columnas HILIC
Se recomienda acetonitrilo:agua (90:10) como disolvente de almacenamiento
a largo plazo para columnas HILIC. Antes del almacenamiento de la columna,
cierre herméticamente los conectores finales con tapones terminales para
evitar que el relleno se reseque. Las columnas pueden almacenarse con
seguridad durante periodos cortos en la mayoría de fases móviles de HILIC.
Sin embargo, para proteger el equipo, lo mejor es eliminar las sales del
instrumento y de la columna mediante el purgado de la columna con la misma
fase móvil sin la solución tampón (por ejemplo, con acetonitrilo:H
O 90:10
2
para eliminar una fase móvil con acetonitrilo:tampón formiato 0,01 M 90:10).
El reequilibrio es más rápido con la fase móvil original cuando se sigue este
planteamiento, pero es necesario realizar varias inyecciones (de 3 a 6) para
verificar el equilibrio de la columna.

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