Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC Guide D'utilisation page 104

Observação: Todos os empacotamentos à base de sílica têm alguma
solubilidade em fases móveis aquosas com pH > 6. Ao utilizar colunas
à base de sílica em pH >6, uma melhor vida útil da coluna é obtida
em temperaturas mais baixas (máx. 40°C) usando concentrações baixas
para o tampão na faixa de 0,01 a 0,02 M.
Observações para o desenvolvimento de métodos da coluna de
fase normal
A fase estacionária é polar por natureza e é melhor utilizada com fases
móveis não polares, como misturas de cloreto de metileno/hexano ou
isopropanol/hexano. O aumento da quantidade de componentes polares
nessas misturas geralmente reduz o tempo de retenção da amostra.
Tipo de coluna
ZORBAX NH2
Polaris NH2
ZORBAX Rx-SIL
ZORBAX SIL
Pursuit XRs Si
Polaris Si-A
InfinityLab Poroshell 120 EC-CN
ZORBAX Eclipse XDB-CN
ZORBAX CN
Observações para o desenvolvimento de métodos
A retenção diminui conforme a polaridade da fase
móvel aumenta.
Muitos volumes de coluna de fase móvel são
necessários para atingir o equilíbrio após alterações na
composição da fase móvel. A quantidade necessária
de volumes de coluna depende do sistema utilizado
e pode variar de 50 a 100 volumes de coluna.
As colunas de sílica não ligadas são muito sensíveis
a quantidades em nível de traços de água nos
solventes e na amostra, portanto deve-se tomar
cuidado para manter a consistência e garantir a
reprodutibilidade do método. Ao utilizar eluição de
gradiente, os solventes primários e secundários
devem ser modificados com álcool ou acetonitrila,
e ao menos 30 colunas de solvente devem poder
fluir pela coluna após finalizar cada execução.
Ao alternar entre solventes, primeiro deve-se
enxaguar a coluna com um solvente mutuamente
miscível, como o álcool isopropílico.
As colunas Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-CN
e ZORBAX Eclipse XDB-CN são enviadas com
solventes de fase reversa, mas também podem
ser utilizadas em aplicações de fase normal após
a limpeza com isopropanol.
A retenção diminui conforme a polaridade da fase
móvel aumenta.
O rápido equilíbrio desta fase ligada com a fase
móvel geralmente faz com que a utilização dessa
coluna seja mais prática do que a de uma coluna
de sílica, principalmente para eluição de gradiente.