Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC Guide D'utilisation page 44

Nota: Todos los rellenos con sílice son algo solubles en fases móviles
acuosas a pH >6. Si se usan columnas basadas en sílice con un pH >6,
se consigue la máxima vida útil de la columna a temperaturas inferiores
(40 °C máx.) con concentraciones del tampón bajas, entre 0,01 y 0,02 M.
Notas sobre el desarrollo de métodos para columnas de fase normal
La fase estacionaria es de naturaleza polar y se usa mejor con fases móviles
no polares, como mezclas de cloruro de metileno/hexano o isopropanol/
hexano. Si se aumenta la cantidad de componente polar de estas mezclas,
normalmente se reduce el tiempo de retención de la muestra.
Tipo de columna
ZORBAX NH2
Polaris NH2
ZORBAX Rx-SIL
ZORBAX SIL
Pursuit XRs Si
Polaris Si-A
InfinityLab Poroshell 120 EC-CN
ZORBAX Eclipse XDB-CN
ZORBAX CN
Notas sobre el desarrollo de métodos
La retención decrece si crece la polaridad de la
fase móvil.
Son necesarios muchos volúmenes de columna
de fase móvil para que se produzca el equilibrio
después de los cambios en la composición de la
fase móvil. El número de volúmenes de columna
necesario depende del sistema en uso y puede ser
de hasta entre 50 y 100 volúmenes de columna.
Las columnas de sílice no ligada son muy sensibles
a las cantidades traza de agua en los disolventes
y en la muestra, por lo que es necesario tener
cuidado para mantener la uniformidad para la
reproducibilidad del método. Cuando se utiliza
la elución en gradiente, deben modificarse los
disolventes tanto primario como secundario con
alcohol o acetonitrilo y se debe permitir el flujo de
al menos 30 columnas de disolvente por la columna
tras la finalización de cada análisis.
Al cambiar de disolvente, primero hay que lavar la
columna con un disolvente mutuamente miscible,
como isopropanol.
Las columnas Agilent InfinityLab Poroshell 120
EC-CN y ZORBAX Eclipse XDB-CN se envían con
disolventes de fase reversa, pero también se
pueden utilizar en aplicaciones de fase normal
después del lavado con isopropanol.
La retención decrece si crece la polaridad de la
fase móvil.
El rápido equilibrio de esta fase ligada con la fase
móvil con frecuencia hace a esta columna más
práctica de usar que una de sílice, en especial para
la elución en gradiente.