Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC Guide D'utilisation page 108

Limpeza da coluna/Prolongamento da vida útil da coluna:
colunas HILIC
É necessário filtrar as amostras antes de injetá-las na coluna. Isso é
especialmente importante para as colunas ZORBAX RRHD HILIC Plus, pois
a frita de entrada da coluna é teoricamente de 0,5 µm e as amostras devem
ser filtradas com um filtro de 0,2 µm. Se o fluxo de solvente parecer restrito
(pressão reversa da coluna excepcionalmente alta), verifique primeiro se o
fluxo do solvente está desobstruído até a entrada da coluna. Se a restrição
for antes da coluna, substitua o pedaço de tubulação ou filtro que está
obstruído. Se a coluna estiver obstruída, a InfinityLab Poroshell 120 HILIC
pode ser submetida ao processo de backflush com 20 a 30 volumes de
coluna da fase móvel. A coluna RRHD HILIC não pode ser submetida ao
processo de backflush. Para remover materiais fortemente retidos da coluna,
limpe-a com um solvente forte; no modo HILIC, este solvente é a água.
As colunas InfinityLab Poroshell HILIC-OH5 podem ser regeneradas através
da lavagem com 50/50 de acetonitrila:50 mM de acetato de amônio a uma
taxa de fluxo baixa por pelo menos 3 horas. Em seguida, equilibre com a
fase móvel. As colunas InfinityLab Poroshell HILIC-Z podem ser regeneradas
através da lavagem com 50/50 de acetonitrila:10 mM de acetato de amônio
a uma taxa de fluxo de 20% da operação normal por pelo menos 3 horas.
Em seguida, equilibre com a fase móvel.
Recomendações de armazenamento: colunas HILIC
Para armazenar colunas HILIC por longos períodos recomenda-se utilizar
a mistura acetonitrila:água (90:10) como solvente. Antes de armazenar
a coluna, os adaptadores de extremidade devem ser bem fechados com
plugues para evitar que o empacotamento seque. As colunas podem ser
armazenadas de forma segura por períodos curtos na maioria das fases
móveis de HILIC. No entanto, para proteger o equipamento, recomenda-
se remover os sais do instrumento e da coluna, purgando a coluna com
a mesma fase móvel sem o tampão (por exemplo, utilizando 90:10 de
ACN:H O para remover uma fase móvel de 90:10 de ACN:0,01 M de
2
tampão de formiato). Ao usar esta abordagem, o equilíbrio é restabelecido
mais rapidamente com a fase móvel original, mas várias (3 a 6) injeções
devem ser realizadas para verificar o equilíbrio da coluna.