Table des Matières
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Interface utilisateur d'analyse
Les premières colonnes de la fenêtre « Comparative
Quantitation
Results »
(Résultats
de
la
quantification
comparative) affichent le numéro et le nom de l'échantillon.
La colonne « Takeoff » (Hausse) indique le point de hausse de
l'échantillon. Le deuxième dérivé du tracé d'amplification
produit des pics correspondant au point maximal de
l'augmentation de la fluorescence dans la réaction. Le point
de hausse est défini comme le cycle auquel le deuxième dérivé
se trouve à 20 % du niveau maximal, il indique la fin du bruit
et la transition vers la phase exponentielle.
Ce graphique montre un deuxième dérivé d'un tracé
d'amplification, indiquant les positions relatives du pic du
deuxième dérivé et du point de hausse.
Niveau maximal du deuxième dérivé
Point de hausse
La colonne « Amplification » indique l'efficacité de l'échantillon.
Une réaction efficace à 100 % donnerait une valeur
d'amplification de 2 pour chaque échantillon, ce qui impliquerait
le doublement de l'amplicon à chaque cycle. Dans les données
brutes, le signal doit doubler dans la phase exponentielle. Par
exemple, si le signal était de 50 unités de fluorescence au
cycle 12 et 51 unités de fluorescence au cycle 13, il doit
augmenter à 53 unités de fluorescence au cycle 14. La moyenne
de toutes les valeurs d'amplification pour chaque échantillon est
réalisée pour produire la valeur d'amplification affichée à droite
de l'écran sous le bouton bascule. Plus la variation entre les
valeurs d'amplification estimées de chaque échantillon est
Manuel d'utilisation du Rotor-Gene Q MDx 5plex HRM (CA) 05/2018
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