Analyse De Fusion Haute Résolution - Qiagen Rotor-Gene Q MDx CE Manuel D'utilisation

Si les résultats de concentration sont linéaires, il s'agit de l'analyse la plus adaptée, car elle offre
à l'utilisateur une analyse statistique de la variation (ANOVA).
« Spline Curve Fit » (Courbe soustraite spline) part simplement du principe que les valeurs de
concentration augmentent avec la fluorescence. Bien que cette approche permette des estimations
plus précises des données non linéaires, elle ne permet pas l'ANOVA, car elle ne se base sur aucun
modèle linéaire.
6.6.11 Analyse de fusion haute résolution
L'analyse de fusion haute résolution (High Resolution Melt, HRM) permet de caractériser des
échantillons d'après la longueur de la séquence, le taux de GC et la complémentarité. L'analyse
HRM est utilisée dans des applications de génotypage, telles que l'analyse des mutations génétiques
ou des polymorphismes mononucléotidiques (Single Nucleotide Polymorphisms, SNP), et dans des
applications d'épigénétique pour l'analyse de la méthylation de l'ADN. L'analyse HRM fournit des
résultats de précision et permet d'économiser des frais de sondes et de marqueurs par rapport à
d'autres méthodes.
Pour réaliser cette analyse, sélectionnez Other (Autre) puis High Resolution Melt Analysis (Analyse
de fusion haute résolution) dans la fenêtre Analysis (Analyse). Double-cliquez sur le canal à
analyser. Les courbes de fusion du canal brut sont normalisées en faisant la moyenne de toutes les
valeurs de fluorescence de début et de fin puis en faisant en sorte que les points de fin de chaque
échantillon soient identiques à la moyenne.
Pour appeler automatiquement les échantillons, cliquez sur Genotypes (Génotypes). Saisissez le
nom du génotype puis le numéro de l'échantillon, qui est utilisé comme contrôle positif pour appeler
automatiquement les échantillons inconnus.
Manuel d'utilisation du Rotor Gene Q MDx CE 02/2022 125