Qiagen Rotor-Gene Q MDx CE Manuel D'utilisation page 123

Préparation d'un cycle d'exécution
Pour effectuer une analyse de concentration, commencez par préparer les étalons et les échantillons
fluorescents, idéalement en triple exemplaire.
Préparation des étalons
Une courbe étalon permet de déterminer la concentration d'ADN dans chaque échantillon mesuré.
L'ADN utilisé pour la courbe étalon doit être un type d'ADN similaire à celui des échantillons
mesurés. La concentration d'au moins un échantillon d'ADN doit être déterminée par
spectrophotométrie UV, et cet échantillon doit être utilisé comme étalon. Vous devez utiliser au
moins 3 étalons (avec réplicats). Il est important de souligner que les étalons d'ADN utilisés dans
la détection de la fluorescence sont uniquement linéaires dans la plage de 1 à 100 ng/µl. Dans
cette plage, si la concentration d'ADN est divisée par deux, le résultat de la fluorescence l'est aussi.
Les intervalles de confiance pour toute concentration extérieure à cette plage sont très larges compte
tenu de la non-linéarité de l'analyse chimique.
Type d'ADN mesuré
Des différences ont été observées dans la mesure de diverses formes d'ADN (p. ex. l'ADN
génomique comparé à l'ADN plasmidique). Il convient donc de mesurer ensemble des types d'ADN
similaires uniquement, évitez d'utiliser l'ADN plasmidique comme étalon lorsque vous mesurez de
l'ADN génomique.
Manuel d'utilisation du Rotor Gene Q MDx CE 02/2022 123