Table des Matières
Publicité
Annexe B
Validation d'une nouvelle analyse
Témoins
Toutes nouvelles analyses doivent être validées par
l'utilisateur. Lors du test d'une nouvelle analyse, utiliser un
échantillon d'ADN de référence et des paramètres du logiciel
PyroMark Q24 MDx adaptés. Les interactions entre les
amorces ou les boucles formées sur l'ADN monobrin
peuvent servir de sites d'amorce pour l'incorporation des
bases par l'ADN polymérase. Il convient d'inclure les
témoins suivants lors d'une première analyse :
Les pyrogrammes de ces témoins ne doivent pas présenter
de pic significatif après un ajout de nucléotide quelconque.
8-16
PCR sans matrice d'ADN. Cela permet d'observer si les
amorces interagissent pour émettre un signal de fond
lors des réactions de pyroséquençage.
PCR avec matrice d'ADN mais sans amorce de
séquençage. Cela permet d'observer si la matrice peut
former des boucles et émettre un signal de fond lors des
réactions de pyroséquençage.
Amorce de séquençage sans produit de PCR. Cela
permet d'observer si l'amorce de séquençage peut
former des doubles brins ou des boucles en épingle à
cheveux et émettre un signal de fond lors des réactions
de pyroséquençage.
Amorce biotinylée sans produit de PCR. Cela permet
d'observer si l'amorce biotinylée peut former des
doubles brins ou des boucles en épingle à cheveux et
émettre un signal de fond lors des réactions de
pyroséquençage.
Amorce de séquençage et amorce biotinylée sans
produit de PCR. Cela permet d'observer si ces deux
amorces peuvent former des doubles brins et émettre un
signal de fond lors des réactions de pyroséquençage.
Manuel d'utilisation du PyroMark Q24 MDx 01/2016
Publicité
Table des Matières
