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Optimisation des performances
Les conseils et recommandations de ce chapitre vous aideront à optimiser les performances de
votre système.
2.1 Recommandations générales
Les recommandations relatives au Système ACQUITY UPLC I-Class sont différentes de celles
qui concernent les systèmes HPLC classiques, principalement du fait des contraintes imposées
au système par la chromatographie sur petites particules, de taille inférieure à 2 µm. La
chromatographie UPLC est une séparation à échelle beaucoup plus petite, mais à résolution plus
élevée, que la chromatographie HPLC. La durée d'analyse est plus courte en UPLC. Les
consommations de solvants et d'échantillons sont significativement réduites.
Le chromatographe ACQUITY UPLC I-Class exige un fonctionnement optimal du Gestionnaire
d'échantillons. La dispersion d'échantillons est plus critique sur les petites colonnes. La réduction
de la durée d'analyse chromatographique oblige également à une gestion efficace de la durée
des cycles.
Lors d'analyses UPLC rapides, la largeur d'un des pics observés peut être inférieure à une demi-
seconde. Waters recommande un taux d'échantillonnage de 25 à 50 points sur la largeur du pic
pour obtenir des dosages corrects.
Le débit ACQUITY UPLC idéal diffère de celui d'une colonne HPLC classique. Le tableau ci-
dessous répertorie les recommandations relatives à l'utilisation des colonnes ACQUITY UPLC
pour les analyses isocratiques et par gradient. Notez que les valeurs répertoriées sont données à
titre indicatif uniquement : la séparation optimale peut avoir lieu à un débit différent.
Tableau 2–1 : Débits idéaux pour la plage de masses moléculaires
Taille de la colonne
2,1 × 50 mm
2,1 × 50 mm
2,1 × 50 mm
2,1 × 50 mm
Suivez les recommandations générales ci-après lors d'une analyse UPLC :
Masse moléculaire
<500
1000
1500
2000
12 septembre 2016, 715005210FRIVD Rév. A
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Débit
600 µL/min
300 µL/min
150 µL/min
100 µL/min
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