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QSight
Method Development (Développement de méthode)
7.
Après avoir identifié le pic de votre analyte, faites un zoom sur le pic en réduisant l'intervalle de masses sur le pic
principal et en réduisant la taille d'incrément et la durée de temporisation.
•
Masse d'intérêt (par exemple 609.3 uma pour la réserpine)
•
Fenêtre de masse : 10 uma (604.3 à 614.3 uma)
•
Taille d'incrément : 0.1 uma
•
Durée de temporisation : 10 ms
8.
Optimisez l'intensité du signal de masse parent (balayage Q1) entre 50 000 et 500 000 comptes par seconde (cps)
en ajustant les paramètres de la spectrométrie de masse, les positions sources ou les concentrations d'analyte
selon vos besoin.
Cette situation est optimale pour obtenir une sensibilité MS/MS raisonnable lors de l'optimisation (des
concentrations de 10 pg/μL à 100 pg/μL sont typiques). Si vous souhaitez réduire l'intensité du signal, réduisez la
concentration de votre composé. Il est également conseillé d'optimiser la position de la sonde et les conditions de
la source. Voir la
Optimisation manuelle de vos sources
9.
Appliquez une rampe au paramètre de tension d'entrée (EV pour Entry Voltage) en cliquant sur la fonction Run
Parameter Ramp (Appliquer rampe aux paramètres) dans le logiciel. Commencez avec les valeurs par défaut de
l'option Ramp (Rampe) pour EV et lancez le balayage lorsque tout est prêt.
10. Une fois la rampe terminée, acceptez l'EV optimisé en effectuant un clic droit dans la zone de données pour
afficher le menu contextuel ; sélectionnez Parameter Ramp/Apply to All (Rampe de paramètres/Appliquer à
tout) ou saisissez manuellement les valeurs optimisées dans le tableau de paramètres Mass (Masse). Cela permet
d'enregistrer la valeur optimisée pour le réglage EV.
11. Désélectionnez la fonction Ramp (Rampe) et recueillez 10 balayages. Vous pourriez avoir besoin de ces balayages
plus tard.
Pour déterminer les fragments de produit du composé d'intérêt
Note : Choisissez un fragment de masse supérieure si possible pour limiter l'interférence par rapport à une masse
inférieure.
1. Dans le panneau central, dans la liste déroulante Experiment Type (Type d'expérience), sélectionnez Product
Scan (Balayage produit). Ensuite, en fonction de votre analyte, réglez le repère Polarity (Polarité) sur le mode
positif (+) ou négatif (-) (dans l'exemple ici, nous avons sélectionné le mode positif). Dans le tableau du panneau
central, définissez les paramètres Start Mass, Stop Mass, Step Size et Dwell Time (Masse initiale, Masse finale, Taille
d'incrément et Durée de temporisation) comme suit pour Q3 :
Valeurs typiques utilisées pour un balayage produit
Intervalle de balayage de masse (approximatif)
Supérieure de 20 à 50 au poids moléculaire du
parent
®
210MD Screening System
à la page 59.
Taille de l'incrément
(uma)
0,1
56
Dwell Time (ms)
(Durée de
temporisation)
1
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