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1.2
Microscopie par épifluorescence
Problème
Manque de visibilité à la
périphérie du champ visuel.
Éclairage inégal dans le
champ visuel.
Le champ visuel n'est pas
visible.
L'image fluorescente n'est
pas visible (lorsque la lampe
est allumée).
L'image fluorescente est
très sombre (lorsque la
lampe est allumée).
Mauvaise qualité de l'image
fluorescente.
Mauvais contraste de
l'image fluorescente.
Cause
Le cube filtre est mal aligné.
L'obturateur est fermé.
Mauvais cube filtre sélectionné.
Les filtres ND du bras d'épifluorescence sont
dans le trajet optique.
L'intensité lumineuse est trop faible pour le filtre
ND de l'éclairage à fibre précentré HG.
Une source lumineuse halogène est utilisée pour
une préparation sombre.
La lampe à vapeur de mercure de l'éclairage à
fibre précentré HG a atteint la fin de sa durée de
vie.
L'objectif préconisé n'est pas utilisé dans le cas
d'une excitation par V ou UV.
La pièce est claire.
La tirette de sélection du trajet optique n'est pas
réglée pour diriger toute la lumière vers la tête
binoculaire.
L'éclairage diascopique est allumé.
Le cube filtre utilisé n'est pas adapté à la
préparation.
L'objectif ou le couvre-objet sont sales.
L'huile d'immersion est fluorescente.
Le couvre-objet est fluorescent.
Mesure corrective
Insérez le cube jusqu'en butée.
(→Chapitre 3, « 6 Montage pour la microscopie par
épifluorescence ― ■ Installation d'un cube filtre »)
Ouvrez l'obturateur.
(→Chapitre 2, « 15 Conseils pour la microscopie par
épifluorescence ― Protection de la préparation contre
la décoloration (obturateur du bras d'épifluorescence)
»)
Utilisez un cube filtre adapté.
(→Chapitre 2, « 15.2 Sélection des filtres »)
Retirez les filtres ND du trajet optique le cas échéant.
(→Chapitre 2, « 15 Conseils pour la microscopie par
épifluorescence ― Réglage de la luminosité de l'image
fluorescente (réglage du filtre ND) ― ■ Filtres ND du
bras d'épifluorescence »)
Procédez au réglage.
(→Consultez le manuel de l'éclairage.)
Remplacez cette source lumineuse par une lampe à
vapeur de mercure.
(→
2, « 15 Conseils pour la microscopie
Chapitre
par épifluorescence
Protection de la
―
préparation contre la décoloration (obturateur du
bras d'épifluorescence) »)
Changez la lampe.
(→Consultez le manuel de l'éclairage.)
Utilisez un objectif préconisé.
Assombrissez-la.
Réglez la tirette de sélection pour diriger toute la
lumière vers la tête binoculaire.
(→Chapitre 2, « 9 Sélection du trajet optique de la tête
»)
Éteignez l'éclairage diascopique.
Utilisez un cube filtre adapté à la préparation.
(→Chapitre 2, « 15.2 Sélection des filtres »)
Procédez à leur nettoyage de façon appropriée.
(→Chapitre 5 « 2.1 Nettoyage des lentilles »)
Utilisez l'huile d'immersion non fluorescente que
nous préconisons.
(→Chapitre 2, « 15 Conseils pour la microscopie par
épifluorescence »)
Utilisez un couvre-objet non fluorescent.
(→Chapitre 2, « 15 Conseils pour la microscopie par
épifluorescence »)
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