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Conseils pour la microscopie par épifluorescence
AVERTISSEMENT
Vous devez manipuler avec une grande précaution la source lumineuse utilisée avec le bras d'épifluorescence (lampe à
vapeur de mercure) en raison de ses propriétés. Veillez à bien avoir pris connaissance de toutes les mises en garde et
consignes mentionnées au début de ce manuel d'utilisation, et de les respecter.
Protection de la préparation contre la décoloration
(obturateur du bras d'épifluorescence)
L'obturateur bloque l'éclairage.
Positionnez
la
tirette
d'épifluorescence sur « C » pour fermer l'obturateur et bloquer le
trajet optique.
Si l'échantillon est exposé en continu à la lumière forte de la lampe à
vapeur de mercure, il risque de s'endommager ou de se décolorer.
Veillez à fermer l'obturateur lorsque vous interrompez une
observation ou lorsque vous passez de la microscopie par
épifluorescence à la microscopie sous éclairage diascopique. Prenez
l'habitude d'effectuer cette opération.
Protection contre la lumière ultraviolette (écran de protection)
L'écran de protection empêche les rayons UV transmis à travers l'objectif et qui se reflètent dans la préparation, d'entrer
dans les yeux de l'observateur.
Utilisation d'un porte-objet, d'un couvre-objet et d'une huile d'immersion non fluorescents
Pour les observations par fluorescence, veillez à utiliser un porte-objet, un couvre-objet non fluorescents et l'huile à
immersion que nous préconisons, afin d'obtenir une image bénéficiant d'un meilleur contraste.
Restriction de l'éclairage à la zone de préparation observée
(réglage du diaphragme de champ)
On utilise le diaphragme de champ pour limiter l'éclairage à la zone de la préparation à observer.
Tournez la tirette du diaphragme de champ du bras d'épifluorescence pour modifier la taille du diaphragme de champ.
Pour des observations standard, diminuez l'ouverture du diaphragme pour que les limites d'ouverture se situent juste à
l'extérieur (ou l'intérieur) du champ visuel. Si vous ouvrez trop le diaphragme de champ et si vous éclairez une zone plus
large que nécessaire, une lumière parasite pénètre dans le champ visuel, ce qui réduit le contraste de l'image. En outre,
la préparation va perdre ses couleurs sur une zone plus large.
Assurez-vous de régler le diaphragme de champ chaque fois que vous changez d'objectif.
Réglage de la luminosité de l'image fluorescente (réglage du filtre ND)
■
Filtres ND du bras d'épifluorescence
Les filtres ND permettent de régler l'intensité lumineuse. Des chiffres élevés pour les filtres correspondent à des
vitesses de transmission plus faibles (i.e. images plus sombres). Les filtres ND n'affectent pas l'éq uilibre
colorimétrique.
Le bras d'épifluorescence intègre trois filtres ND (ND4, ND8 et ND16).
Poussez la tirette du filtre ND pour insérer le filtre ND dans le trajet optique et assombrir l'image fluorescente.
de
l'obturateur
située
sur
le
bras
Ouverture/fermeture de l'obturateur
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