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Immersion dans l'eau
Les objectifs marqués « WI » ou « W » sont des objectifs à immersion dans l'eau. Ces objectifs sont utilisés en
appliquant de l'eau d'immersion (eau distillée ou sel physiologique) entre la préparation et l'extrémité de
l'objectif. Les procédures d'observation sont les mêmes qu'avec les objectifs à immersion dans l'huile.
Étant donné que l'eau s'évapore facilement, contrôlez la quantité d'eau d'immersion pendant l'observation.
Évitez d'utiliser trop d'eau, car l'excédent d'eau peut s'écouler sur la platine et autour du conden seur et
favoriser ainsi la corrosion.
Essuyage de l'eau
Après utilisation, essuyez l'eau sur l'extrémité de l'objectif et du condenseur, puis essuyez avec de l'alcool absolu.
Si vous détectez des taches d'eau, appliquez un détergent neutre et essuyez doucement, puis nettoyez avec de
l'alcool absolu.
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Conseils pour la microscopie à contraste de phase
La microscopie à contraste de phase est adaptée à l'observation de préparations claires et incolores, non teintées ou
légèrement teintées, décolorées, ainsi qu'à l'observation des coupes ultrafines destinées aux microscopes électroniques.
La méthode de contraste de phase n'est pas adaptée aux préparations moyennement ou fortement colorées.
L'apparence d'une image à contraste de phase varie en fonction du contraste de phase ou de la forme de la préparation,
et en fonction des caractéristiques de l'objectif. Procédez de la manière suivante lorsque vous préparez la préparation ou
sélectionnez un objectif Ph.
Sélectionnez une préparation pour laquelle le centre du module de phase Ph est aligné correctement.
Le centre du module de phase Ph ne sera pas correctement aligné si vous observez une préparation qui produit de la
lumière diffuse ou génère un effet de lentille ou de prisme. Ceci est particulièrement vrai pour les préparations épaisses,
surdimensionnées et les préparations utilisant une microplaque : le centre n'est pas correctement aligné en raison de l'effet
de lentille ou de prisme, ce qui rend difficile l'observation de la préparation.
Objectif Ph et préparation
Les objectifs Ph font référence aux objectifs « achromatiques », « planachromatiques », « plan fluor » et «
planapochromatiques » selon le degré d'ajustement de l'aberration chromatique et de la courbure de champ. Ces catégories
se divisent également en plusieurs sous-types, en fonction des caractéristiques du module de phase interne. Pour obtenir
des résultats satisfaisants, le degré de contraste de phase de la préparation doit correspondre aux caractéristiques du
module phase. Reportez-vous au tableau ci-dessous pour consulter les caractéristiques d'usage des objectifs Ph.
Lorsque vous utilisez un objectif Ph à fort contraste, veillez à ce que le contraste de phase de la préparation ne dépasse
pas le degré de contraste de phase autorisé (latitude). Si le degré du contraste de phase de la préparation est supérieur à
celui autorisé, l'observation est impossible car l'image est plus éclairée que l'arrière-plan.
Vous pouvez augmenter ou réduire le contraste de phase en modifiant l'épaisseur de la préparation, et l'indice de
réfraction du milieu de montage ou du milieu de culture lors de l'élaboration d'une préparation pour contraste de phase.
Une préparation faiblement contrastée sous un objectif DLL peut produire de meilleurs résultats sous un objectif DM.
Objectif à
contraste Ph
DLL
DL
En général, un objet doté d'un
contraste de phase plus élevé est
plus sombre.
Contraste
Par conséquent, l'image est noire
dans un champ visuel relativement
DM
foncé
plus clair, semblable à celui
observé en microscopie en fond
clair.
DM
Caractéristiques d'usage des objectifs Ph
Aspect
Adapté à une
observation
détaillée
notamment à
l'aide du
micro-
contraste.
Contraste
Latitude
Intermédiair
Contraste de phase
e
et objet absorbant
(pour un
(chromosome) en
usage plus
latitude faible et
large)
intermédiaire
Élevé
(apour un
usage
Objet transparent
relativement
en faible latitude
plus
restreint)
Élevé
Objet transparent
(apour un
en faible latitude
usage
relativement
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Exemple d'usage
Spore de bactérie, bactérie
vivante générale, préparation
légèrement épaisse, bactérie,
préparation teintée, œuf,
particule de matière grasse,
cristallin, etc.
Bactérie et protozoaire
flagellé, fibre de base de
fibrine, granule fin, coupe
sélective de milieu de
montage, coupe ultrafine,
etc.
Bactérie et protozoaire
flagellé, fibre de base de
fibrine, granule fin, coupe
sélective de milieu de
montage, coupe ultrafine,
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