Table des Matières
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QwikCheck™
5.
Placer le microscope sur une magnification de x200. Placer la grille au centre du champ de visualisation.
6.
Effectuer au moins un double comptage de 200 billes. Confirmer que la différence est acceptable en calculant la somme
et la différence des deux valeurs. Se référer à la table 2.4 du WHO Manual, 5th Edition pour déterminer si ces valeurs
sont acceptables. Recommencer avec de nouveau échantillons si cela n'est pas le cas.
7.
Calculer la moyenne des deux valeurs obtenues.
8.
Le nombre de billes observes dans 10 carrés représente la concentration en millions. Donc, si 5 carrés ont été utilisés,
on multiplie la valeur par deux.
9.
Comparer les résultats obtenus avec les valeurs cibles mentionnées sur la boite.
Chambre à lame couvre-objet fixe (20-microde profondeur, pas de dilution, Champs de vision au
microscope doivent être établis):
Suivre les instructions du vendeur pour l'utilisation de la chambre choisie.
1.
Les chambres à couvre-objets fixes peuvent ne pas avoir d'aire de comptage déterminée et il appartient donc à l'utilisateur
de déterminer les champs de vision nécessaires à l'obtention d'une valeur fiable.
magnification de X200 ou X400.
graduée vendue dans le commerce. La formule pour converti les billes/champ est: # billes/champs de vision est : C =
N/F (C= concentration en M/ml; N= # bille comptées par champ de vision; F= facteur de conversion). Si ce facteur de
conversion n'est pas renseigné par le fabricant, il peut être calculé en multipliant le champ de vue par 1000. (Exemple:
SI le champs de vue est une aire de 0.159 mm
2
est : 0.159 (mm
) X 0.02 (mm) X 1000 (pour convertir en M/ml) = 3.18. If, sous un champ de vue du microscope, on
compte 138 billes, la concentration sera de 138/3.18 = 43.4 M/ml
2.
Homogénéiser les billes par rotation du flacon dans la main (ne pas utiliser de vortex). Aucune dilution n'est requise pour
un comptage en chambre à couvre-objet fixe.
3.
Remplir la chambre avec un volume de 3-5 µl de billes ou de contrôle négatif à partir des deux côtés de la chambre.
4.
Placer l'agrandissement du microscope sur une magnification de x200 or x400 et positionner le champ de vue à 1/3 de
la distance entre le bord de la chambre et le côté opposé.
5.
Compter deux fois 200 billes en comptant dans les deux goutes places dans les côtés opposes de la chambre. Confirmer
que la différence est acceptable en calculant la somme et la différence des deux valeurs. Se référer à la table 2.4 du
WHO Manual, 5th Edition pour déterminer si ces valeurs sont acceptables. Recommencer avec de nouveau échantillons
si cela n'est pas le cas.
6.
Calculer la moyenne des deux valeurs obtenues.
7.
Convertir les valeurs obtenues en M/ml par les formules décrites au point 1 ci-dessus.
ATTENTION: NE PAS REUTILISER les billes ou les REPLACER DANS LEUR FLACON après emploi.
Toujours utiliser un capillaire neuf pour chaque niveau de billes.
So les résultats ne correspondent pas aux valeurs cibles émises sur le lot de QwikCheck
1.
Problème lors de la manipulation des liquides
Si les QwikCheck-beads n'ont pas été suffisamment mélangées ou si on observe une présence de bulles d'air.
o
Le capillaire ou la chambre de comptage n'ont pas été préparées conformément aux instructions lors du
o
remplissage des bulles ou du contrôle négatif.
Le kit de QwikCheck-beads est expiré, le liquide est contaminé, mélangé avec un autre ou un ancien lot de billes
o
ou les bouteilles n'ont pas été correctement refermées..
Le même capillaire a été réutilisé pour différents lots de billes.
o
2.
Problème de matériel ou facteurs subjectifs:
La valeur de référence introduite est erronée.
o
La chambre de comptage est inappropriée, endommagée ou trop vieille.
o
Une erreur de calcul ou de dilution a été faite lors des calculs de concentration (facteur subjectif)
o
Recommandations: Vérifier la date d'expiration des billes. Recommencer avec des échantillons frais après analyse des
différentes options. Suivre scrupuleusement les indications de comptage pour chaque type de chambre ou d'appareillage.
Si les valeurs cibles ne sont pas atteinte, contacter le fournisseur pour de l'aide.
.
Limitations: Le kit
QwikCheck
erreurs techniques ou de matériel.
References
: WHO Laboratory Manual for the Examination and Processing of Human Semen, 5
Sperm Quality Analyzer Guide Version 1.00
Pour déterminer les champs de vue, utiliser un objectif oculaire gradué ou une lame
TM
beads ne peut être utilisé pour un contrôle de qualité de la mobilité ou pour corriger des
I-Button WHO 5th_1_JUN_2018
2
et la chambre a une profondeur de 20 microns, le facteur de conversion
34
Placer le microscope à une
TM
beads le problème peut être :
th
Edition, WHO, 2010.
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