Optika Italy B-380 Manuel D'utilisation page 44

Les objets d'amplitude présentent un excellent contraste quand la lumière diffractée et directe sont hors phase
d'1/2 de longueur d'onde. La méthode de Zernike était celle d'accélérer la lumière directe d' 1/4 de longueur
d'onde pour que la différence de longueur d'onde entre lumière directe et lumière déviée d'un échantillon de
phase soit de 1/2 de longueur d'onde. En conséquence, la lumière directe et diffractée arrivant au niveau de
l'image dans les oculaires serait en mesure de produire une interférence destructive. Les résultats de ce pro-
cédé sont les détails de l'image qui apparaissent plus foncé sur un fond clair. Celà prend le nom de contraste
de phase positif (Figure 2)
Un autre cours possible est d'organiser de ralentir la lumière directe en 1/4 de longueur d'onde de sorte que la
lumière diffractée et la lumière directe arrivent à l'oculaire en step et peuvent interférer de manière constructive.
Cet arrangement donne une image claire des détails de l'échantillon sur un fond noir, et est appelé contraste
négatif (voir la figure 3).
Les accessoires nécessaires pour l'observation en contraste de phase sont un condenseur pour contraste de
phase équipé d'anneaux et un ensemble d'objectifs à contraste de phase, chacun avec une lame de phase
installée. L'équipement de phase, comprend généralement un filtre vert (pour augmenter la résolution) et un
télescope de phase (pour centrer les anneaux).
Les techniques de microscopie de phase sont particulièrement utiles avec les échantillons minces et dispersés
dans le champ de vision. Il y a quelques limites dans la microscopie en contraste de phase:
• Les images de phase sont généralement entourés de halos autour des contours des détails. Ces halos sont
des artefacts optiques, qui obscurcissent parfois les bords des détails.
• Les anneaux de phase limitent l'ouverture numérique du système optique à une certaine valeur, réduisant
ainsi la résolution.
• Le contraste de phase ne fonctionne pas bien avec les échantillons épais
• en raison des changements de phase provoquée par des zones légèrement en dessous ou légèrement au-
dessus du plan de mise au point.
• Les images de phase apparaissent en gris si on travaille en lumière blanche et ent vert si un filtre vert
• est utilisé
Figure 2
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Figure 3