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Introducción al contraste de fases
Las preparaciones sin teñir y por lo tanto transparentes que no absorben la luz se llama "muestras de fases",
ya que alteran ligeramente la luz que pasa a través de ellos, por lo general el contraste de fases retarda 1/4 de
longitud de onda con respecto a la luz directa y sin desvío, que pasa a través de una muestra teñida. Desgra-
ciadamente los ojos, como los sensores de las cámaras, no son capaces de apreciar estas diferencias de fase.
El ojo humano sólo es sensible a los colores del espectro visible (variaciones en la frecuencia de la luz) o de
diferentes niveles de intensidad de luz (variaciones en la amplitud de la onda de luz).
En los objetos de fase, el "punto cero" de la luz pasa a través o alrededor de la muestra sin ninguna desvia- ción.
La luz diffractada por el objeto no se reduce en amplitud (como en muestras opacas), pero es "retarda- da",
lenta (retardo de fase) debido a la función del índice de refracción y el espesor de la muestra. Esta luz difrac-
tada, disminuida alrededor de 1/4 de longitud de onda, llega al plano de la imagen con la luz desviada, pero en
interferencia, esencialmente disminuida en intensidad. El resultado es que la imagen a nivel del ocu- lar carece
de contraste para hacer visible los detalles casi invisibles.
Zernike tuvo éxito en el desarrollo de un método, ahora conocida como microscopía de contraste de fase, que
permite obtener imágenes nítidas de objetos transparentes como si fueran muestras opacas.
Una ilustración esquemática de la configuración de un microscopio de contraste de fase se muestra en la figura
1.
Anillo de
fases
Luz
desviada
Objetivo
Muestra
Condensador
Anillo
anular
Luz procedente de
la fuente
Figure 1
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