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10.3.6 Lavage des barrettes de colonnes
Pour les étapes suivantes, l'utilisation de la micropipette à 8 canaux et des réservoirs pour réactifs
est recommandée (pour les volumes de tampon requis en cas d'utilisation des réservoirs pour
réactifs, voir le tableau 1).
En cas d'utilisation des réservoirs pour tampons, préparer la quantité appropriée de solutions tampons.
Nombre
d'échantillons
8
à extraire
Tampon W1
6,5 ml
Tampon W2*
16 ml
Tableau 1 : Quantité requise de solutions tampons pour n = x échantillons
* Avant la première utilisation, ajouter 200 ml d'éthanol (voir également le chapitre 10.1).
Ajouter 600 μl de tampon W1 à chaque puits des barrettes de colonnes (figure 9 a+b).
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Figure 9 : a) Pipetage du tampon W1 dans le réservoir
pour tampons.
Régler le vide sur -200 mbar avec le manomètre.
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Appliquer doucement le vide en ouvrant le robinet de vide jusqu'à ce que les lysats soient
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passés à travers les colonnes (figure 8).
Arrêter le vide directement en fermant le robinet de vide une fois que tout le liquide est passé à
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travers les colonnes (environ 30 secondes) pour éviter la formation de mousse.
Ajouter 900 μl de tampon W2 à chaque puits des barrettes de colonnes.
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Régler le vide sur -200 mbar avec le manomètre.
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Appliquer le vide jusqu'à ce que le tampon soit passé à travers les colonnes (environ 30 secondes).
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Arrêter le vide directement en fermant le robinet de vide une fois que tout le liquide est passé à
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travers les colonnes (environ 30 secondes) pour éviter la formation de mousse.
Ajouter 900 μl de tampon W2 à chaque puits des barrettes de colonnes.
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Régler le vide sur -200 mbar avec le manomètre.
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Appliquer le vide jusqu'à ce que tout le tampon soit passé à travers les colonnes (environ 30 secondes).
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Arrêter le vide directement en fermant le robinet de vide une fois que tout le liquide est passé à
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travers les colonnes (environ 30 secondes) pour éviter la formation de mousse.
Éteindre la pompe à vide et libérer le vide.
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Kit d'extraction d'ADN - Instructions d'utilisation
®
Révision 00 / Février 2011
16
24
12 ml
17,5 ml
32 ml
48 ml
b) Ajout du tampon W1 aux puits des barrettes de colonnes.
32
40
23 ml
28,5 ml
64 ml
80 ml
48
34 ml
96 ml
30
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